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菁優(yōu)網(wǎng)新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測(cè),方法是取檢測(cè)者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測(cè)過程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈“熒光信號(hào)的強(qiáng)度也等比例增加,可通過熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如圖)。請(qǐng)回答下列問題:
(1)題中“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中應(yīng)該含有:檢測(cè)者mRNA、
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
、
熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針
熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針
、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物dNFP、緩沖體系。
(2)如果要同時(shí)擴(kuò)增兩種基因,則試劑盒中的引物應(yīng)該有
4
4
種,引物的作用是
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(3)如圖中“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能的原因是
試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加
試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加
。理論上,在檢測(cè)過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測(cè)結(jié)果呈
(填“陰“或“陽“)性,但為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過閾值時(shí)才確診。現(xiàn)有甲乙兩個(gè)待檢樣本,檢測(cè)時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請(qǐng)給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確):
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。
(4)除核酸檢測(cè)外,研究人員還研發(fā)了利用生產(chǎn)單克隆抗體的技術(shù),生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。當(dāng)雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),為防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)采取的措施是
定期更換培養(yǎng)液
定期更換培養(yǎng)液
,最后所得抗體的優(yōu)點(diǎn)是:
特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
。

【答案】熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針;4;使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加;陽;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;定期更換培養(yǎng)液;特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:39引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問題:菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、
     
    、
     

    (2)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測(cè)參與以上過程的酶有DNA聚合酶、
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     
    。
    (3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     
    。
    A.dGTP,dATP,dTTP
    B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
    D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
    (4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    催化①過程的酶是
     
    ;核酸酶H的作用是
     
    。如果某RNA單鏈中一共有80個(gè)堿基,其中C有15個(gè),A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個(gè)雙鏈 DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為
     
    (以上過程不考慮引物)。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7
  • 2.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、
     
    。
    (2)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     

    A.dGTP、dATP、dTTP
    B.dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP、dATP、dTTP、dCTP
    D.ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
    (3)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測(cè)參與以上過程的酶有DNA連接酶
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:12引用:1難度:0.7
  • 3.Sanger法DNA測(cè)序技術(shù)的核心原理:由于雙脫氧核苷酸(ddNTP)的2'和3'都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個(gè)含有4種脫氧核苷酸(dNTP)的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP(分別為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),在PCR過程中復(fù)制隨機(jī)終止,產(chǎn)生四組不同長度的一系列終止處帶有標(biāo)記的DNA片段。然后在變性凝膠(加入尿素等堿性物質(zhì))上進(jìn)行電泳和放射自顯影后,可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測(cè)分子的DNA序列,具體過程見圖。
    注:ddA是ddATP的縮寫形式。
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    (1)如圖1中Ⅰ過程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是
     
    ,dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是
     
    ,為什么該過程中需要添加引物?
    (2)材料中提到“在變性凝膠上進(jìn)行電泳……”,請(qǐng)解釋“變性”
     
    ,為什么要變性處理?
     

    (3)如果電泳結(jié)果如圖2所示,請(qǐng)寫出待測(cè)DNA分子的序列
     

    (4)某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被32P標(biāo)記且以堿基“C”為末端、不同長度的子鏈DNA片段,在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等,還需加入哪些原料
     
    。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:16引用:1難度:0.7
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