新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測(cè),方法是取檢測(cè)者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測(cè)過程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈“熒光信號(hào)的強(qiáng)度也等比例增加,可通過熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如圖)。請(qǐng)回答下列問題:
(1)題中“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中應(yīng)該含有:檢測(cè)者mRNA、
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
、熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針
熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針
、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物dNFP、緩沖體系。
(2)如果要同時(shí)擴(kuò)增兩種基因,則試劑盒中的引物應(yīng)該有4
4
種,引物的作用是使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。
(3)如圖中“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能的原因是試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加
試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加
。理論上,在檢測(cè)過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測(cè)結(jié)果呈陽
陽
(填“陰“或“陽“)性,但為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過閾值時(shí)才確診。現(xiàn)有甲乙兩個(gè)待檢樣本,檢測(cè)時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請(qǐng)給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確):甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。
(4)除核酸檢測(cè)外,研究人員還研發(fā)了利用生產(chǎn)單克隆抗體的技術(shù),生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。當(dāng)雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),為防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)采取的措施是定期更換培養(yǎng)液
定期更換培養(yǎng)液
,最后所得抗體的優(yōu)點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
。