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PCR是利用體內(nèi)DNA復制的原理,進行生物體外復制特定 DNA片段的核酸合成技術。請回答有關問題:菁優(yōu)網(wǎng)
(1)PCR反應的基本步驟是變性、
退火(復性)
退火(復性)
、
延伸
延伸
。
(2)科學家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
5'→3'
5'→3'
方向的聚合反應。圖1表示細胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復制過程,有一條子鏈是先合成短的DNA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA聚合酶、
解旋酶
解旋酶
、
DNA連接酶
DNA連接酶
。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細胞內(nèi)染色體 DNA的復制過程特點是
細胞內(nèi)是邊解旋邊復制
細胞內(nèi)是邊解旋邊復制
,PCR過程的特點是
先完全解旋再復制
先完全解旋再復制
。
(3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結構如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進行電泳分離可得到
3
3
種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實驗順利進行,在PCR反應管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
B
B
。
A.dGTP,dATP,dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
(4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進行PCR擴增示意圖。
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催化①過程的酶是
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
;核酸酶H的作用是
切除RNA(水解RNA)
切除RNA(水解RNA)
。如果某RNA單鏈中一共有80個堿基,其中C有15個,A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈 DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為
384個
384個
(以上過程不考慮引物)。

【答案】退火(復性);延伸;5'→3';解旋酶;DNA連接酶;細胞內(nèi)是邊解旋邊復制;先完全解旋再復制;3;B;逆轉(zhuǎn)錄酶;切除RNA(水解RNA);384個
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7
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    (1)PCR反應的基本步驟是變性、復性、
     

    (2)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結構如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈DNA片段進行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈DNA片段。為使實驗順利進行,在PCR反應管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     

    A.dGTP、dATP、dTTP
    B.dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP、dATP、dTTP、dCTP
    D.ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
    (3)科學家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應。圖1表示細胞內(nèi)染色體DNA的復制過程,有一條子鏈是先合成短的DNA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA連接酶
     
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細胞內(nèi)染色體DNA的復制過程特點是
     
    ,PCR過程的特點是
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:12引用:1難度:0.7
  • 2.PCR又稱聚合酶鏈式反應,在基因工程中常用它特異性地快速擴增目的基因。下列有關PCR的敘述錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 8:30:1組卷:18引用:2難度:0.6
  • 3.Sanger法DNA測序技術的核心原理:由于雙脫氧核苷酸(ddNTP)的2'和3'都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以中斷DNA分子合成反應。在四個含有4種脫氧核苷酸(dNTP)的DNA體外合成反應體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標記的ddNTP(分別為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),在PCR過程中復制隨機終止,產(chǎn)生四組不同長度的一系列終止處帶有標記的DNA片段。然后在變性凝膠(加入尿素等堿性物質(zhì))上進行電泳和放射自顯影后,可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列,具體過程見圖。
    注:ddA是ddATP的縮寫形式。
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    (1)如圖1中Ⅰ過程橫線①中應該加入的物質(zhì)是
     
    ,dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是
     
    ,為什么該過程中需要添加引物?
    (2)材料中提到“在變性凝膠上進行電泳……”,請解釋“變性”
     
    ,為什么要變性處理?
     

    (3)如果電泳結果如圖2所示,請寫出待測DNA分子的序列
     

    (4)某同學要通過PCR技術獲得被32P標記且以堿基“C”為末端、不同長度的子鏈DNA片段,在反應管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應緩沖液等等,還需加入哪些原料
     
    。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:16引用:1難度:0.7
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