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獼猴桃風(fēng)味獨特,營養(yǎng)豐富,Vc含量高,是20世紀(jì)由野生到商業(yè)栽培最成功的馴化植物之一?;卮鹣铝袉栴}:
(1)獼猴桃雌雄異株,個體基因型高度雜合,可通過種內(nèi)
雜交
雜交
育種使雙親基因重組,產(chǎn)生高度變異的新品種獼猴桃。在進(jìn)行人工栽培品種與野生毛花獼猴桃遠(yuǎn)緣種間雜交時發(fā)現(xiàn)近九成種子胚發(fā)育中止,這可能是因為它們之間存在
生殖隔離
生殖隔離
。若要使該胚繼續(xù)發(fā)育獲得植株,可采用的方法是
胚離體培養(yǎng)
胚離體培養(yǎng)
。
利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗蟲基因?qū)氆J猴桃愈傷組織,培育出抗蟲獼猴桃新品種。
(2)若要獲得已知序列的抗蟲基因,可采用
化學(xué)合成法
化學(xué)合成法
或PCR擴(kuò)增的方法。為確??瓜x基因正確連接到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上并保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,構(gòu)建表達(dá)載體時需選用2種限制酶,一般選擇的原則有
BC
BC
(多選)。
A.抗蟲基因內(nèi)每種限制酶只有一個切割位點
B.受體農(nóng)桿菌細(xì)胞中不含有該種限制酶
C.酶切后,Ti質(zhì)粒形成的兩個末端序列不相同
D.為利于切割,限制酶識別的堿基序列長度越短越好
(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與獼猴桃愈傷組織混合培養(yǎng),使
T-DNA攜帶的目的基因
T-DNA攜帶的目的基因
整合到獼猴桃基因組中,完成轉(zhuǎn)化實驗。篩選出的愈傷組織經(jīng)過
再分化
再分化
形成胚狀體,可進(jìn)一步發(fā)育形成轉(zhuǎn)基因植株。
利用品質(zhì)優(yōu)良的獼猴桃與抗寒性極強(qiáng)的軟棗獼猴桃進(jìn)行體細(xì)胞雜交,得到適應(yīng)低溫地區(qū)栽種的優(yōu)良新品種,其部分過程如下:
(4)原生質(zhì)體的游離與純化:將外植體
消毒
消毒
,加入含有甘露醇溶液的
纖維素酶和果膠
纖維素酶和果膠
酶溶液中處理,一段時間后過濾取濾液。將濾液低速離心,吸除上層的細(xì)胞碎片及
酶液
酶液
,將沉淀物反復(fù)懸浮、離心,得到提純的原生質(zhì)體。為防止原生質(zhì)體
再生細(xì)胞壁
再生細(xì)胞壁
而影響融合效果,應(yīng)盡快誘導(dǎo)兩個獼猴桃品種的原生質(zhì)體融合。
(5)原生質(zhì)體融合:為增加異源融合的機(jī)會,將提取純化的兩種原生質(zhì)體
等比例
等比例
混合,通過添加適宜濃度的化學(xué)誘導(dǎo)劑
聚乙二醇
聚乙二醇
促進(jìn)融合,篩選出雜交細(xì)胞后進(jìn)一步培養(yǎng)可得到體細(xì)胞雜交植株。
【答案】雜交;生殖隔離;胚離體培養(yǎng);化學(xué)合成法;BC;T-DNA攜帶的目的基因;再分化;消毒;纖維素酶和果膠;酶液;再生細(xì)胞壁;等比例;聚乙二醇
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/15 8:0:9組卷:9引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.1965年中國科學(xué)家人工合成了具有生物活性的結(jié)晶牛胰島素,摘取了人工合成蛋白質(zhì)的桂冠,如圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)。請回答下列問題。
    ?菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)質(zhì)粒上ori序列的堿基特點是
     
    比值較高,圖示胰島素基因的轉(zhuǎn)錄以
     
    鏈作為模板。
    (2)在設(shè)計PCR引物時最好在引物的
     
    端添加限制酶
     
    的識別序列,PCR反應(yīng)體系中引物的延伸需要TaqDNA聚合酶,此酶需要
     
    (離子)的激活。
    (3)生產(chǎn)過程中目的基因是利用胰島B細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因,不直接使用細(xì)胞中酶切獲得的的胰島素基因原因是
     

    (4)科學(xué)家運用大引物PCR定點突變技術(shù)對胰島素第28位氨基酸實現(xiàn)了替換,獲得了速效胰島素類似物產(chǎn)品。相關(guān)原理如圖所示。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    ①第一次PCR至少需要
     
    個循環(huán)才能獲得相應(yīng)的大引物模板,第二次PCR應(yīng)選用大引物兩條鏈中的
     
    (填“A”或“B”),若第二次PCR計劃循環(huán)n次,至少需要大引物
     
    個。
    ②β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落為白色。將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種到添加了
     
    的培養(yǎng)基上,若觀察到菌落呈現(xiàn)白色,則表明
     
    。
    發(fā)布:2024/10/12 15:0:1組卷:21引用:1難度:0.6
  • 2.種子大小是作物重要的產(chǎn)量性狀。研究者對野生型擬南芥(2n=10)進(jìn)行誘變篩選到一株種子增大的突變體。通過遺傳分析和測序,發(fā)現(xiàn)野生型DAI基因發(fā)生一個堿基G到A的替換,突變后的基因為隱性基因,據(jù)此推測突變體的表型與其有關(guān),開展相關(guān)實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)擬采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將野生型DAI基因轉(zhuǎn)入突變體植株,用PCR反應(yīng)擴(kuò)增DAI基因,用限制性內(nèi)切核酸酶對PCR產(chǎn)物和
     
    進(jìn)行切割,用DNA連接酶將兩者連接。為確保插入的DAI基因可以正常表達(dá),其上下游序列需具備
     
    。
    (2)轉(zhuǎn)化后,T-DNA(其內(nèi)部基因在減數(shù)分裂時不發(fā)生交換)可在基因組單一位點插入也可以同時插入多個位點。在插入片段均遵循基因分離及自由組合定律的前提下,選出單端一位點插入的植株,并進(jìn)一步獲得目的基因穩(wěn)定遺傳的植株(如圖),用于后續(xù)驗證突變基因與表型的關(guān)系。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    ①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T0代植株并自交,將T1代種子播種在選擇培養(yǎng)基上,能夠萌發(fā)并生長的陽性個體即表示其基因組中插入了
     
    。
    ②T1代陽性植株自交所得的T2代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基,選擇陽性率約
     
    %的培養(yǎng)基中幼苗繼續(xù)培養(yǎng)。
    ③將②中選出的T2代陽性植株
     
    (填“自交”、“與野生型雜交”或“與突變體雜交”)所得的T3代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基,陽性率達(dá)到
     
    %的培養(yǎng)基中的幼苗即為目標(biāo)轉(zhuǎn)基因植株。
    發(fā)布:2024/10/15 0:0:1組卷:9引用:1難度:0.4
  • 3.RNA沉默是雙鏈RNA被特異性的核酸酶降解,產(chǎn)生小干擾RNA(siRNA),這些siRNA與同源的靶RNA互補(bǔ)結(jié)合,特異降解靶RNA,從而抑制基因表達(dá)。棉蚜是棉花的主要害蟲,嚴(yán)重危害棉花的生產(chǎn)。E基因是棉蚜生長發(fā)育的重要基因,為了控制棉蚜對棉花的危害,科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù),在棉花中表達(dá)棉蚜E基因的雙鏈RNA(dsRNA),特異性抑制棉蚜內(nèi)源E基因的表達(dá)。如圖是主要流程,請回答:

    限制酶 識別序列和切點
    EcoRⅠ G↓AATTC
    KpnⅠ G↓GTACC
    BamHⅠ G↓GATCC
    XbaⅠ T↓CTAGA
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)根據(jù)PCR1反應(yīng)體系中加入的引物1和2推測PCR2中加入的引物為
     
    。
    A.5'-AAATCTAGAAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
    B.5'-AAATCTAGACTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
    C.5'-AAAGGATCCAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
    D.5'-AAAGGATCCCTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
    (2)從理論上推測,PCR1第五輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物1的DNA片段所占的比例為
     
    。圖中正義序列和反義序列中堿基排列順序
     
    (填“大多數(shù)相同”或“大多數(shù)不同”或“相同”或“不同”)。過程①需要的工具酶除限制酶外還需要
     

    (3)過程②將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到經(jīng)
     
    處理的農(nóng)桿菌菌株后,為了確定重組質(zhì)粒已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化可以通過
     
    驗證。
    (4)過程④愈傷組織形成棉花植株的過程稱為
     
    。轉(zhuǎn)基因棉花再生植株移栽到溫室后,葉片涂抹
     
    檢測抗性,并提取DNA進(jìn)行PCR分析。
    (5)科研人員采用特定的方法大量提取成功轉(zhuǎn)化的4株棉花植株葉片的基因組DNA,用HindⅢ完全消化,消化產(chǎn)物經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜后與目的基因的探針雜交,其雜交帶結(jié)果如圖2所示(圖中數(shù)字2~5代表轉(zhuǎn)化成功的植株,數(shù)字1代表對照組)。下列有關(guān)分析正確的有
     

    ①對照組可以用非轉(zhuǎn)基因棉花的基因組DNA進(jìn)行實驗
    ②數(shù)字3所代表的植株中目的基因插入染色中的兩個不同位置
    ③選擇HindⅢ進(jìn)行消化的原因是基因組DNA中一般只有1~2切點
    ④相同位置上雜交帶對應(yīng)DNA片段的脫氧核苷酸序列相同
    (6)科研人員進(jìn)一步鑒定上述4號泳道對應(yīng)的植株,確定獲得一株轉(zhuǎn)基因抗性植株CZ4,CZ4連續(xù)自交兩代,則F2中抗性植株占比為
     
    發(fā)布:2024/10/17 17:0:4組卷:11引用:1難度:0.4
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