當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年江蘇省淮安市高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

細(xì)胞核定位信號(hào)（NLS）能夠促進(jìn)蛋白定位于細(xì)胞核中，科研人員通過基因工程技術(shù)，將NLS基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因融合，插入植物雙元表達(dá)載體pRI101中，獲得一個(gè)新的pRI101-NLS-GFP植物表達(dá)載體，該載體有望在病原菌蛋白細(xì)胞生物學(xué)功能研究中得到廣泛應(yīng)用。請(qǐng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)流程回答下列問題：

（1）若已知NLS基因的脫氧核苷酸序列，則可采用
人工合成
人工合成
法獲得該目的基因。該方法在獲取目的基因時(shí)
不需要
不需要
（填“需要”或“不需要”）模板。
（2）在構(gòu)建NLS-GFP融合基因時(shí)，需在設(shè)計(jì)引物
5’端
5’端
時(shí)添加同源序列。將添加同源序列的GFP與NLS融合，用特定的DNA酶處理，形成黏性末端，然后降溫以促進(jìn)
黏性末端堿基配對(duì)
黏性末端堿基配對(duì)
形成NLS-GFP融合基因。
（3）為獲得融合熒光蛋白，設(shè)計(jì)P₄時(shí)不能包含終止密碼子的編碼序列，否則將導(dǎo)致
綠色熒光蛋白（GFP）不含有NLS定位信號(hào)
綠色熒光蛋白（GFP）不含有NLS定位信號(hào)
。
（4）過程④在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選擇
NdeⅠ、SmaⅠ
NdeⅠ、SmaⅠ
酶連接。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)需要用氯化鈣處理，其目的
使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
。
（5）在受體細(xì)胞中，NLS被相應(yīng)蛋白質(zhì)識(shí)別后通過
核孔
核孔
進(jìn)入
細(xì)胞核
細(xì)胞核
，所以可觀察到綠色熒光主要漿集在此處。為了更具科學(xué)性，應(yīng)向?qū)φ战M的受體細(xì)胞中導(dǎo)入
不含融合基因雙元表達(dá)載體pRⅠ101
不含融合基因雙元表達(dá)載體pRⅠ101
質(zhì)粒。

【答案】人工合成；不需要；5’端；黏性末端堿基配對(duì)；綠色熒光蛋白（GFP）不含有NLS定位信號(hào)；NdeⅠ、SmaⅠ；使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)；核孔；細(xì)胞核；不含融合基因雙元表達(dá)載體pRⅠ101

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/7/4 8:0:9組卷：5引用：2難度：0.6

相似題

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　　）

A．可以將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞

B．實(shí)驗(yàn)過程中采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因

C．檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是抗原-抗體雜交

D．目的基因只存在于動(dòng)物的乳腺細(xì)胞中

發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：5引用：1難度：0.9

解析

2．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并將其分泌到尿液中．這是繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展．
（1）將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用的方法是

．所使用到儀器是

．
（2）在基因工程中，將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)，必須用

酶和

酶．常用的運(yùn)載體有

、

、

等，而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件，例如應(yīng)具有

以便進(jìn)行篩選．進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的

中，原因是

．
（3）通常采用

技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中．
（4）在研究膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的

細(xì)胞中特異性表達(dá)．
（5）如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于

．
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：1難度：0.3
解析
3．抗凝血酶是一種天然抗凝血?jiǎng)谂R床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：

（1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因，應(yīng)選用引物

（填引物名稱），擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶

切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
（2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動(dòng)子，其作用是

，將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長(zhǎng)出了多個(gè)大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是

。
（3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過

方法導(dǎo)入到豬或羊的

細(xì)胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
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1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（ ）

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　　）