人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,為防止有害代謝產(chǎn)物的積累,可采取
定期更換培養(yǎng)液
定期更換培養(yǎng)液
的措施。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是 加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體形成更多能產(chǎn)生抗cTnI抗體的B淋巴細(xì)胞
加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體形成更多能產(chǎn)生抗cTnI抗體的B淋巴細(xì)胞
,最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,與植物原生質(zhì)體融合方法不同是還可以用 滅活病毒誘導(dǎo)法
滅活病毒誘導(dǎo)法
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(2)甲、乙、丙中,只含雜交瘤細(xì)胞的是 乙和丙
乙和丙
,②過程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行多次 克隆化培養(yǎng)
克隆化培養(yǎng)
和 抗體陽性檢測(cè)
抗體陽性檢測(cè)
,其目的是篩選獲得 既能大量增殖又能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞
既能大量增殖又能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞
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(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如圖所示:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與同一抗原結(jié)合,這是由于 不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合
不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合
。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是 抗體與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化特定底物反應(yīng)產(chǎn)生檢測(cè)產(chǎn)物,可通過測(cè)定產(chǎn)物量來判斷待測(cè)抗原量
抗體與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化特定底物反應(yīng)產(chǎn)生檢測(cè)產(chǎn)物,可通過測(cè)定產(chǎn)物量來判斷待測(cè)抗原量
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