磷是植物生長(zhǎng)和發(fā)育所必需的大量元素之一，在土壤缺磷條件下，OsPHR2基因可顯著提高植物對(duì)磷的吸收。為獲得能高效利用磷的轉(zhuǎn)基因小麥植株，科學(xué)家以普通小麥為受體，采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)對(duì)OsPHR2基因和草銨膦抗性基因進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化，如圖表示表達(dá)載體片段和酶切位點(diǎn)。

回答下列問題：
（1）制備轉(zhuǎn)化片段：首先利用

A

A

（A．HindⅢ酶  B．BamHⅠ酶和KpnⅠ酶  C．BamHⅠ酶和HindⅢ酶   D．SacⅠ酶和KpnⅠ酶）切環(huán)狀表達(dá)載體，獲得如圖線性轉(zhuǎn)化片段，該片段中除含有OsPHR2基因和草銨膦抗性基因外，還應(yīng)含有

啟動(dòng)子和終止子

啟動(dòng)子和終止子

。
（2）轉(zhuǎn)基因小麥：將小麥種子在無菌條件下進(jìn)行

消毒

消毒

，剝?nèi)∮着呓臃N于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)過脫分化后形成

愈傷組織

愈傷組織

。通過基因槍法將轉(zhuǎn)化片段導(dǎo)入受體材料中，從受體材料角度考慮，影響轉(zhuǎn)化成功率的因素有

小麥的品種、基因型和生理狀態(tài)等

小麥的品種、基因型和生理狀態(tài)等

（寫1點(diǎn)即可）。
（3）培養(yǎng)與移栽：將轉(zhuǎn)基因小麥?zhǔn)荏w組織暗培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基上，利用

草銨膦

草銨膦

進(jìn)行篩選，將獲得的叢狀苗轉(zhuǎn)移至

生根

生根

培養(yǎng)基上，獲得試管苗后經(jīng)

煉苗（或鍛煉）

煉苗（或鍛煉）

才可移栽。
（4）轉(zhuǎn)OsPHR2基因植株的檢測(cè)：提取轉(zhuǎn)基因小麥植株葉片基因組DNA，分別對(duì)目的基因OsPHR2進(jìn)行

PCR

PCR

，其擴(kuò)增產(chǎn)物通過

電泳（或瓊脂糖凝膠電泳）

電泳（或瓊脂糖凝膠電泳）

進(jìn)行分離，結(jié)果如圖2。
陽(yáng)性對(duì)照組和空白對(duì)照組檢測(cè)反應(yīng)體系配方的區(qū)別是，前者需加入

OsPHR2基因

OsPHR2基因

。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明

4、5、7

4、5、7

組植株目的基因已經(jīng)整合到小麥基因組中。
（5）利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲取磷高效吸收利用的小麥新品種，它的環(huán)保價(jià)值有

減少土壤富營(yíng)養(yǎng)化

減少土壤富營(yíng)養(yǎng)化

（寫1點(diǎn)即可）。