人體心肌細胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。請據(jù)圖分析回答下列問題:
(1)動物細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH維持培養(yǎng)液的pH。
(2)為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的 抗生素抗生素。為了防止有害代謝物的積累,可采用 定期更換培養(yǎng)液定期更換培養(yǎng)液的方法,以便清除代謝物。
(3)每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是 加強免疫,刺激小鼠機體產(chǎn)生更多的B淋巴細胞加強免疫,刺激小鼠機體產(chǎn)生更多的B淋巴細胞,最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細胞懸液與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合。
(4)甲、乙、丙中,只含雜交瘤細胞的是 乙和丙乙和丙,②過程表示將乙細胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進行抗體陽性檢測,之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測,并多次重復(fù)上述操作,其目的是篩選獲得 能產(chǎn)生(特異性強、靈敏度高的)抗cTnI抗體的雜交瘤細胞能產(chǎn)生(特異性強、靈敏度高的)抗cTnI抗體的雜交瘤細胞。
(5)上述單克隆抗體生產(chǎn)過程應(yīng)用到了動物細胞融合和 動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)生物技術(shù)。
【答案】維持培養(yǎng)液的pH;抗生素;定期更換培養(yǎng)液;加強免疫,刺激小鼠機體產(chǎn)生更多的B淋巴細胞;乙和丙;能產(chǎn)生(特異性強、靈敏度高的)抗cTnI抗體的雜交瘤細胞;動物細胞培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/7 8:0:9組卷:1引用:3難度:0.6
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(1)檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞,檢測細胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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