脫氧核苷三磷酸(dNTP)3'-C上的-OH脫O后轉(zhuǎn)化為雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。在PCR反應(yīng)體系中加入模板、4種dNTP、1種32P標(biāo)記的ddNTP和1種引物及其它所需材料,經(jīng)擴(kuò)增后獲得不同長(zhǎng)度的DNA片段混合物。分別利用如圖所示4種32P標(biāo)記的ddNTP進(jìn)行PCR后,將產(chǎn)物點(diǎn)樣在變性凝膠上進(jìn)行電泳分離,通過(guò)放射性自顯影檢測(cè),就可以讀出DNA的核苷酸序列。如圖為某待測(cè)DNA片段的電泳檢測(cè)結(jié)果,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是( )
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】C
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/11/23 12:0:1組卷:18引用:1難度:0.5
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1.科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因(SLA-2基因),構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體,進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1,SLA-2基因長(zhǎng)度為1100bp,質(zhì)粒B的總長(zhǎng)度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)回答:
限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
(2)過(guò)程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是
(3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳,請(qǐng)?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫(huà)出可能得到的電泳條帶。
(4)科研中常用呤霉素對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選,一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因是:既可以讓大部分沒(méi)有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓
(5)過(guò)程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測(cè)腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽,其原理是發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:41引用:3難度:0.6 -
2.以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù),其中說(shuō)法正確的是( ?。?/h2>
A.DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最大 B.PCR的兩種引物一般20-30個(gè)核苷酸,過(guò)長(zhǎng)易發(fā)生引物內(nèi)部的折疊 C.對(duì)PCR循環(huán)30次之后的DNA分子進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,與標(biāo)樣對(duì)照判斷是否存在目的基因片段 D.瓊脂糖凝膠電泳從陰極加樣,分子量較大的接近于加樣孔 發(fā)布:2024/12/15 16:30:6組卷:5引用:1難度:0.5 -
3.下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn),說(shuō)法錯(cuò)誤的是( )
A.PCR利用了DNA的熱變性原理,通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制 B.PCR的產(chǎn)物一般要通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定 C.凝膠中DNA分子的遷移速率只與DNA分子的大小有關(guān) D.為避免外源DNA等因素的污染,PCR實(shí)驗(yàn)中使用的工具也需要滅菌處理 發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:3引用:1難度:0.6
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