α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）是下呼吸道中最主要的蛋白酶抑制劑，其在血清中含量越低，肺氣腫越易發(fā)生。α 1-AT 補(bǔ)充治療不僅是先天性 α1-AT 缺乏癥的主要治療方法，而且也為其他炎癥性肺疾病的治療開辟了新的途徑。我國科研人員通過基因工程的方法生產(chǎn)α1-AT并用于臨床，如圖是科研人員選用的載體（圖中bp表示堿基對，α 1-AT基因為1182bp）。回答下列問題。
?
注：質(zhì)粒除圖示部位外以及目的基因內(nèi)部和外部均無XbaⅠ、SacⅠ、HindⅢ三種限制酶的識別位點。
（1）基因表達(dá)載體的作用是 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在（答出1點即可）。質(zhì)粒中與該作用相關(guān)的結(jié)構(gòu)除圖中所示外，還有 復(fù)制原點復(fù)制原點。
（2）從人體獲得α1-AT基因后，通過PCR技術(shù)快速擴(kuò)增。該技術(shù)的前提是 已知α1-AT基因兩端的核苷酸序列已知α1-AT基因兩端的核苷酸序列，以便設(shè)計引物，引物在DNA復(fù)制中的作用是 使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，理由是 為維持反應(yīng)體系的pH相對穩(wěn)定，保證酶作用的最適條件為維持反應(yīng)體系的pH相對穩(wěn)定，保證酶作用的最適條件。
（3）在引物設(shè)計上，科研人員需要在兩種引物上分別添加合適的限制酶識別序列，理由是 目的基因兩端不含有限制酶XbaⅠ和HindⅢ的識別位點，且引物的3'端開始連接脫氧核苷酸目的基因兩端不含有限制酶XbaⅠ和HindⅢ的識別位點，且引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，添加位置應(yīng)位于引物的 5'5'（填“5”或“3”）端。
（4）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需將 α1-AT基因與 血清蛋白血清蛋白的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，啟動子是 RNA聚合酶的RNA聚合酶的識別、結(jié)合的序列，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。
（5）科研人員在構(gòu)建基因表達(dá)載體時選用的限制酶是XbaⅠ和HindⅢ，操作成功后的基因表達(dá)載體長 1253912539bp。沒有選擇限制酶XbaⅠ和SacⅠ的理由是 無法篩選空質(zhì)粒和重組質(zhì)粒無法篩選空質(zhì)粒和重組質(zhì)粒。
（6）現(xiàn)對篩選出的5只轉(zhuǎn)基因羊個體進(jìn)行DNA水平的檢測，判斷目的基因是否導(dǎo)入成功。請?zhí)顚懕砀?，完成實驗設(shè)計：
| 組別 | 實驗組1-5 | 對照組1 | 對照組2 |
| 模板 | ① 提取的1-5號個體的DNA 提取的1-5號個體的DNA |
② 基因表達(dá)載體 基因表達(dá)載體 |
空載體 |
| PCR體系中加入的其他物質(zhì) | 擴(kuò)增緩沖液、水、引物、TaqDNA聚合酶、四種脫氧核苷酸 | ||
| 電泳預(yù)期結(jié)果 | 有條帶 | 有條帶 | 無條帶 |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在；復(fù)制原點；已知α1-AT基因兩端的核苷酸序列；使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；為維持反應(yīng)體系的pH相對穩(wěn)定，保證酶作用的最適條件；目的基因兩端不含有限制酶XbaⅠ和HindⅢ的識別位點，且引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；5'；血清蛋白；RNA聚合酶的；12539；無法篩選空質(zhì)粒和重組質(zhì)粒；提取的1-5號個體的DNA；基因表達(dá)載體
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/7/12 8:0:9組卷：7引用：1難度：0.5
相似題
-
1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國科研團(tuán)隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示。回答下列問題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~