定點(diǎn)突變技術(shù)是指通過(guò)PCR等方法改變DNA片段特定位點(diǎn)的堿基，從而獲得突變基因的操作技術(shù)。研究者將釀酒酵母S288c的APAⅠ基因與EGFP（增強(qiáng)型綠色熒光蛋白）基因構(gòu)成融合基因，并進(jìn)一步構(gòu)建表達(dá)載體，以該載體為模板，再通過(guò)PCR介導(dǎo)的定點(diǎn)突變技術(shù)向APAⅠ基因中分別引入APAⅠ-1/2/3/4四個(gè)突變位點(diǎn)，分別轉(zhuǎn)化釀酒酵母YS59。回答下列問(wèn)題：
（1）構(gòu)建APAⅠ基因與EGFP基因的融合基因時(shí).需借助的工具酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶，使APAⅠ基因與EGFP基因首尾相連，處在同一 啟動(dòng)子啟動(dòng)子、終止子終止子等調(diào)控序列的控制之下；EGFP基因的作用是 作為標(biāo)記基因作為標(biāo)記基因。
（2）上述PCR介導(dǎo)的定點(diǎn)誘變過(guò)程中，除以載體為模板外，還需要加入四種 脫氧核苷酸脫氧核苷酸，兩種根據(jù) APA1基因APA1基因的序列設(shè)計(jì)合成且含有突變位點(diǎn)的互補(bǔ)的引物。
（3）若在熒光顯微鏡下觀察到受體細(xì)胞有綠色熒光，表明 APA1基因與EGFP基因已經(jīng)表達(dá)（形成蛋白質(zhì)產(chǎn)物）APA1基因與EGFP基因已經(jīng)表達(dá)（形成蛋白質(zhì)產(chǎn)物）。
（4）若將定點(diǎn)突變的基因?qū)胫参锛?xì)胞，在一定 營(yíng)養(yǎng)和激素營(yíng)養(yǎng)和激素（答出2點(diǎn)）等條件下，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化形成 愈傷組織愈傷組織，進(jìn)一步誘導(dǎo)其 再分化再分化可以發(fā)育成轉(zhuǎn)基因植株。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】限制酶、DNA連接酶；啟動(dòng)子；終止子；作為標(biāo)記基因；脫氧核苷酸；APA1基因；APA1基因與EGFP基因已經(jīng)表達(dá)（形成蛋白質(zhì)產(chǎn)物）；營(yíng)養(yǎng)和激素；愈傷組織；再分化
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：12引用：3難度：0.7
相似題
-
1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來(lái)源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~