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菁優(yōu)網(wǎng)蚊子是瘧原蟲的中間宿主,瘧原蟲需要在蚊子體內(nèi)繁殖到一定階段才具備傳染性。某科研團(tuán)隊(duì)通過基因工程改造過的蚊子會在其內(nèi)臟中產(chǎn)生抗菌肽,可一定程度地破壞瘧原蟲的細(xì)胞膜,以達(dá)到抗瘧疾的作用。
(1)可通過PCR反應(yīng)擴(kuò)增能產(chǎn)生抗菌肽的目的基因,其原理為
DNA半保留復(fù)制
DNA半保留復(fù)制
。如圖是將PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳的結(jié)果,據(jù)此推斷圖中
A
A
(“A”或“B”)DNA片段的分子量更大。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,除目的基因的電泳條帶外,凝膠上還出現(xiàn)一條異常條帶,從引物設(shè)計角度分析,出現(xiàn)該異常條帶的原因可能是
引物與非目的序列有同源性/容易形成二聚體
引物與非目的序列有同源性/容易形成二聚體
。除上述方法外,還可以通過
基因文庫/反轉(zhuǎn)錄/人工合成
基因文庫/反轉(zhuǎn)錄/人工合成
來獲取目的基因。
(2)常用
顯微注射
顯微注射
法將目的基因?qū)胛米蛹?xì)胞中;檢測目的基因是否成功導(dǎo)入并翻譯,需事先用
抗菌肽
抗菌肽
作抗原制備抗體。
(3)轉(zhuǎn)入抗菌肽基因后同時造成蚊子的壽命減短,分析發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)的S基因在實(shí)驗(yàn)中被破壞,若利用基因敲除技術(shù)探究S基因是否與蚊子的壽命縮短有關(guān),請寫出你的實(shí)驗(yàn)思路:
敲除正常蚊子的S基因,與未敲除S基因的正常蚊子做對照實(shí)驗(yàn),比較其壽命的長短
敲除正常蚊子的S基因,與未敲除S基因的正常蚊子做對照實(shí)驗(yàn),比較其壽命的長短

【答案】DNA半保留復(fù)制;A;引物與非目的序列有同源性/容易形成二聚體;基因文庫/反轉(zhuǎn)錄/人工合成;顯微注射;抗菌肽;敲除正常蚊子的S基因,與未敲除S基因的正常蚊子做對照實(shí)驗(yàn),比較其壽命的長短
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題:菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、
     
     
    。
    (2)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA聚合酶、
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     
    。
    (3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     
    。
    A.dGTP,dATP,dTTP
    B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
    D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
    (4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    催化①過程的酶是
     
    ;核酸酶H的作用是
     
    。如果某RNA單鏈中一共有80個堿基,其中C有15個,A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈 DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為
     
    (以上過程不考慮引物)。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7
  • 2.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、
     
    。
    (2)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     

    A.dGTP、dATP、dTTP
    B.dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP、dATP、dTTP、dCTP
    D.ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
    (3)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA連接酶
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:12引用:1難度:0.7
  • 3.Sanger法DNA測序技術(shù)的核心原理:由于雙脫氧核苷酸(ddNTP)的2'和3'都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個含有4種脫氧核苷酸(dNTP)的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP(分別為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),在PCR過程中復(fù)制隨機(jī)終止,產(chǎn)生四組不同長度的一系列終止處帶有標(biāo)記的DNA片段。然后在變性凝膠(加入尿素等堿性物質(zhì))上進(jìn)行電泳和放射自顯影后,可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列,具體過程見圖。
    注:ddA是ddATP的縮寫形式。
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    (1)如圖1中Ⅰ過程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是
     
    ,dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是
     
    ,為什么該過程中需要添加引物?
    (2)材料中提到“在變性凝膠上進(jìn)行電泳……”,請解釋“變性”
     
    ,為什么要變性處理?
     

    (3)如果電泳結(jié)果如圖2所示,請寫出待測DNA分子的序列
     

    (4)某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被32P標(biāo)記且以堿基“C”為末端、不同長度的子鏈DNA片段,在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等,還需加入哪些原料
     
    。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:16引用:1難度:0.7
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