21.重組蛋白疫苗相當(dāng)于把病毒最有效的抗原成分的基因整合到酵母菌、大腸桿菌等微生物細(xì)胞或某些特定動(dòng)物細(xì)胞內(nèi),然后在體外大量培養(yǎng),表達(dá)出病毒的特定蛋白,再收獲、提純?cè)撎囟ǖ鞍?,最后制成疫苗。如圖為Real-timePCR過程圖,當(dāng)熒光物質(zhì)(F)游離出來才能發(fā)出熒光,通過檢測(cè)反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度,可以達(dá)到檢測(cè) PCR產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的。(注:聚合酶能催化磷酸二酯鍵的生成和斷裂。)請(qǐng)回答下列問題:
(1)基因工程中獲取目的基因的方法除從相關(guān)的已知結(jié)構(gòu)和功能清晰的基因中進(jìn)行篩選外,常用方法還有
和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。
(2)上述 Real-time PCR反應(yīng)過程中,使用的材料包括
(答出兩點(diǎn)即可)、合適的緩沖液,引物以及探針?;旌虾玫腜CR反應(yīng)體系,在熱循環(huán)儀中進(jìn)行由
組成的多次循環(huán)過程,即可進(jìn)行DNA的大量擴(kuò)增。
(3)探針完整時(shí),熒光物質(zhì)(F)所發(fā)出的熒光會(huì)被猝滅物質(zhì)(Q)吸收,經(jīng)過第1、2步引物和探針均與模板鏈結(jié)合,請(qǐng)仔細(xì)觀察上圖的第2、3步,解釋通過檢測(cè)反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度,可以達(dá)到檢測(cè)PCR產(chǎn)物擴(kuò)增量目的的原因是
。
(4)質(zhì)粒作為基因工程常用的載體工具,應(yīng)具備的基本條件有
(答出兩點(diǎn)即可),而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有
,若受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞,則動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體條件是
。