44.有資料表明胃癌細胞中有胃泌素相關(guān)基因的表達,而且外源性胃泌素對胃癌細胞有明顯促進生長的作用。某科研人員為驗證外源性胃泌素的上述作用,以及進一步研究丙谷胺對其作用的影響,進行了以下實驗研究。請完善實驗思路,并根據(jù)實驗結(jié)果進行分析。
(要求與說明:用細胞流式測定儀測定細胞周期分布;實驗結(jié)果測定的具體操作不作要求;培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液變化忽略不計;實驗條件適宜)
(1)完善實驗思路:
①將X型胃癌細胞培養(yǎng)3天后制備細胞懸液備用。用細胞培養(yǎng)液配制適宜濃度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取適量等量細胞懸液加入4組培養(yǎng)瓶中待繼續(xù)培養(yǎng),每組若干,各組處理如下。
甲組:
;
乙組:50μL丙谷胺溶液+50uL細胞培養(yǎng)液;
丙組:
;
丁組:100μL細胞培養(yǎng)液。
③將上述樣品在適宜條件下進行培養(yǎng)。48h后取部分樣品測定
,并記錄。
④
,并記錄。
⑤對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,結(jié)果如下。
表:胃泌素和丙谷胺對X型胃癌細胞增殖及細胞周期的影響
組別 |
72h,570nm |
48h,各時期細胞百分比(%) |
OD值 |
G1 |
S |
G2+M |
甲 |
0.767±0.025 |
55.60 |
25.20 |
19.20 |
乙 |
0.559±0.020 |
70.10 |
20.05 |
9.85 |
丙 |
0.585±0.022 |
68.60 |
21.10 |
10.30 |
丁 |
0.561±0.026 |
70.00 |
20.00 |
10.00 |
(注:OD值大小可體現(xiàn)細胞增殖情況;丁組細胞的細胞周期T=20h。)
(2)實驗分析與討論:
甲組與丁組數(shù)據(jù)比較,說明甲組的處理最可能是促進了S期細胞的
,從而促進腫瘤細胞增殖。乙、丁組數(shù)據(jù)幾乎沒有差異,但甲、丙組數(shù)據(jù)差異明顯,可見丙谷胺具有
作用。