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有資料表明胃癌細(xì)胞中有胃泌素相關(guān)基因的表達(dá),而且外源性胃泌素對(duì)胃癌細(xì)胞有明顯促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。某科研人員為驗(yàn)證外源性胃泌素的上述作用,以及進(jìn)一步研究丙谷胺對(duì)其作用的影響,進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)研究。請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)思路,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。
(要求與說(shuō)明:用細(xì)胞流式測(cè)定儀測(cè)定細(xì)胞周期分布;實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)定的具體操作不作要求;培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)液變化忽略不計(jì);實(shí)驗(yàn)條件適宜)
(1)完善實(shí)驗(yàn)思路:
①將X型胃癌細(xì)胞培養(yǎng)3天后制備細(xì)胞懸液備用。用細(xì)胞培養(yǎng)液配制適宜濃度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取適量等量細(xì)胞懸液加入4組培養(yǎng)瓶中待繼續(xù)培養(yǎng),每組若干,各組處理如下。
甲組:
50uL胃泌素+50uL細(xì)胞培養(yǎng)液
50uL胃泌素+50uL細(xì)胞培養(yǎng)液
;
乙組:50μL丙谷胺溶液+50uL細(xì)胞培養(yǎng)液;
丙組:
50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液
50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液
;
丁組:100μL細(xì)胞培養(yǎng)液。
③將上述樣品在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。48h后取部分樣品測(cè)定
細(xì)胞周期分布
細(xì)胞周期分布
,并記錄。
72h后取剩余樣品在570nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值
72h后取剩余樣品在570nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值
,并記錄。
⑤對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果如下。
表:胃泌素和丙谷胺對(duì)X型胃癌細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響
組別 72h,570nm 48h,各時(shí)期細(xì)胞百分比(%)
OD值 G1 S G2+M
0.767±0.025 55.60 25.20 19.20
0.559±0.020 70.10 20.05 9.85
0.585±0.022 68.60 21.10 10.30
0.561±0.026 70.00 20.00 10.00
(注:OD值大小可體現(xiàn)細(xì)胞增殖情況;丁組細(xì)胞的細(xì)胞周期T=20h。)
(2)實(shí)驗(yàn)分析與討論:
甲組與丁組數(shù)據(jù)比較,說(shuō)明甲組的處理最可能是促進(jìn)了S期細(xì)胞的
DNA復(fù)制
DNA復(fù)制
,從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖。乙、丁組數(shù)據(jù)幾乎沒有差異,但甲、丙組數(shù)據(jù)差異明顯,可見丙谷胺具有
抑制外源性胃泌素
抑制外源性胃泌素
作用。

【答案】50uL胃泌素+50uL細(xì)胞培養(yǎng)液;50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液;細(xì)胞周期分布;72h后取剩余樣品在570nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值;DNA復(fù)制;抑制外源性胃泌素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:4難度:0.7
相似題
  • 1.細(xì)胞周期包括分裂間期(分為G1期、S期和G2期)和分裂期(M期)。如圖標(biāo)注了甲動(dòng)物(2n=12)腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞周期各階段的時(shí)長(zhǎng)及DNA含量。

    (1)在電子顯微鏡下觀察處于M期的細(xì)胞,可見紡錘體的形成機(jī)制是
     
    。在M期中,染色單體的出現(xiàn)發(fā)生在
     
    期,染色體數(shù)與核DNA數(shù)之比為1:2在
     
    期。
    (2)圖乙中細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)兩個(gè)峰值,右側(cè)峰值表示圖甲中的
     
    期細(xì)胞,兩個(gè)峰值之間(不含峰值)的細(xì)胞對(duì)應(yīng)圖甲中的
     
    期細(xì)胞。
    (3)若用適量/少量含放射性同位素的胸苷(DNA復(fù)制的原料之一)短期培養(yǎng)甲動(dòng)物腸上皮細(xì)胞后,處于S期的細(xì)胞都會(huì)被標(biāo)記。洗脫含放射性同位素的胸苷,換用無(wú)放射性的新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng),定期檢測(cè)。預(yù)計(jì)最快約
     
    h后會(huì)檢測(cè)到被標(biāo)記的M期細(xì)胞。
    (4)從被標(biāo)記的M期細(xì)胞開始出現(xiàn)到其所占M期細(xì)胞總數(shù)的比例達(dá)到100%時(shí),所經(jīng)歷的時(shí)間為
     
    h。
    (5)若向甲動(dòng)物腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中加入過(guò)量胸苷,處于S期的細(xì)胞立刻被抑制,而處于其他時(shí)期的細(xì)胞不受影響。預(yù)計(jì)加入過(guò)量胸苷約
     
    h后,細(xì)胞都將停留在S期(及其G1與S的交界處)。
    (6)聯(lián)系上述(3)~(5)題,接在第(5)后面,為了將所有細(xì)胞都停留于G1與S的交界處,應(yīng)充分洗脫過(guò)量胸苷后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)入含有適量胸苷的培養(yǎng)液中培養(yǎng)
     
    h后,再轉(zhuǎn)入加入過(guò)量胸苷的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間。

    發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:15引用:1難度:0.6
  • 2.細(xì)胞周期包括分裂間期(分為G1期、S期和G2期)和分裂期(M期)。如圖標(biāo)注了甲動(dòng)物(體細(xì)胞染色體數(shù)為12)腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞周期各階段的時(shí)長(zhǎng)及DNA含量,請(qǐng)回答下列問題:
    (1)若用含放射性同位素的胸苷(DNA復(fù)制的原料之一)短期培養(yǎng)甲動(dòng)物腸上皮細(xì)胞后,處于S期的細(xì)胞都會(huì)被標(biāo)記。洗脫含放射性同位素的胸苷,換用無(wú)放射性的新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng),定期檢測(cè)。預(yù)計(jì)最快約
     
    h后會(huì)檢測(cè)到被標(biāo)記的M期細(xì)胞。
    (2)從被標(biāo)記的M期細(xì)胞開始出現(xiàn)到其所占M期細(xì)胞總數(shù)的比例達(dá)到最大值并開始減少時(shí),所經(jīng)歷的時(shí)間為
     
    h,處于該期的一個(gè)細(xì)胞中染色體數(shù)目最多為
     
    條。
    (3)與高等植物細(xì)胞相比,兩者細(xì)胞分裂過(guò)程的差異與
     
    (填細(xì)胞器)有關(guān)。
    (4)M期細(xì)胞的染色體上基因很難轉(zhuǎn)錄,原因是
     

    發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:7引用:1難度:0.7
  • 3.使用特定的方法可以抑制蠶豆根尖細(xì)胞的分裂,使細(xì)胞停留在分裂的某一階段,如下表所示,“√”表示停留時(shí)期。由此表不能得出的結(jié)論是( ?。?
    處理方法 時(shí)期
    間期 前期 中期 后期 末期
    加入過(guò)量的胸苷
    秋水仙素
    低溫(2~4℃)

    發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:4引用:1難度:0.7
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