21.幽門螺桿菌(Hp)屬于一類致癌物,Hp與胃炎、消化性潰瘍和胃癌等多種疾病有關(guān)。Hp的Ipp20基因能合成其特有的Ipp20蛋白質(zhì),科研人員據(jù)此利用基因工程制備Hp疫苗,該過程所選擇的質(zhì)粒及操作步驟如圖所示。回答下列問題:
(1)通過PCR擴(kuò)增Ipp20基因的反應(yīng)需要在
溶液中進(jìn)行,擴(kuò)增Ipp20基因時(shí)的基本條件包括DNA模板、原料、Taq DNA聚合酶、
等。
(2)在PCR反應(yīng)體系中一般需要加入Mg
2+,原因是
??蒲腥藛T探究了不同濃度的Mg
2+對(duì)PCR擴(kuò)增效果的影響,結(jié)果如表所示。科研人員認(rèn)為PCR反應(yīng)高效進(jìn)行,Mg
2+濃度并不是越高越好,據(jù)表分析,依據(jù)是
。
Mg2+濃度/(mmol?L-1) |
0 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
Ipp20基因相對(duì)含量 |
- |
+ |
++ |
+++++ |
++++ |
+++ |
注:“-”表示未檢測(cè)到Ipp20基因,“+”表示檢測(cè)到Ipp20基因,且“+”越多,檢測(cè)到的含量越多。
(3)已知在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)使用了限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割質(zhì)粒和Ipp20基因??蒲腥藛T采用了影印法篩選含有Ipp20基因的大腸桿菌,即使用無菌的線氈布?jí)涸谂囵B(yǎng)基A(添加潮霉素)的菌落上,帶出少許菌種,平移并壓在培養(yǎng)基B(添加氯霉素)上。根據(jù)圖示結(jié)果分析,含有Ipp20基因的大腸桿菌應(yīng)從培養(yǎng)基
中獲取,理由是
。