12.某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Amp
r或Tet
r中會導致相應的基因失活(Amp
r表示氨芐青霉素抗性基因,Tet
r表示四環(huán)素抗性基因).有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連接反應,用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化.被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌.回答下列問題:
(1)限制性核酸內(nèi)切酶作為基因工程的工具,其作用特點是
.
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的,其原因是
;并且
和
的細胞也是不能區(qū)分的,其原因是
.在上述篩選的基礎上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有
的固體培養(yǎng)基.
(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復制所需的模板來自于
.