21．大腸桿菌是水體中常見(jiàn)的微生物，經(jīng)改造的大腸桿菌可用來(lái)檢測(cè)制藥廠排出的污水中某化合物X（一種遺傳毒性雜質(zhì)，可損傷細(xì)胞DNA，具有致癌可能）的含量?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）大腸桿菌在含有伊紅—亞甲藍(lán)的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，菌落呈深紫色并有金屬光澤；據(jù)此可用于檢測(cè)污染水體中大腸桿菌的數(shù)量。上述培養(yǎng)基是否屬于選擇培養(yǎng)基？說(shuō)明理由。
（2）圖1中甲、乙、丙、丁是從微生物中分離到的可被化合物X激活的4種毒性響應(yīng)基因啟動(dòng)子（箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向）；圖2質(zhì)粒中SRR基因的表達(dá)產(chǎn)物可使大腸桿菌等細(xì)菌裂解。將4種啟動(dòng)子分別插入質(zhì)粒的P區(qū)，以構(gòu)建表達(dá)載體，導(dǎo)入大腸桿菌可獲得對(duì)化合物X敏感的工程菌。
①圖2質(zhì)粒中的P區(qū)能被細(xì)胞中
酶識(shí)別并結(jié)合，以實(shí)現(xiàn)SRR基因的表達(dá)。
②為使4種啟動(dòng)子正確插入到質(zhì)粒上，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增啟動(dòng)子時(shí)，需分別在4種啟動(dòng)子A端和B端添加限制酶
和
的酶切位點(diǎn)。
③為初步檢測(cè)表達(dá)載體是否構(gòu)建成功，可用上述兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒和4種表達(dá)載體進(jìn)行切割，然后對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳，檢測(cè)結(jié)果如圖3所示。由此可初步判定表達(dá)載體的構(gòu)建
（填“成功”或“不成功”）
④作為受體細(xì)胞的大腸桿菌需要
。
A．DNA具有限制酶的酶切位點(diǎn)
B．能抗氨芐青霉素
C．能在含化合物X的培養(yǎng)液中生長(zhǎng)
（3）將獲得的工程菌甲、乙、丙、丁和對(duì)照菌分別培養(yǎng)在細(xì)菌培養(yǎng)液中，2小時(shí)后在培養(yǎng)液中加入化合物X繼續(xù)培養(yǎng)，檢測(cè)細(xì)菌的密度，結(jié)果如圖4所示。
①實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照菌是
。
②實(shí)驗(yàn)中對(duì)細(xì)菌密度的統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)為
。
A．稀釋涂布平板法
B．利用細(xì)菌計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)
C．A或B均可
③據(jù)圖可知，4種工程菌均啟動(dòng)了對(duì)化合物X的響應(yīng)，判斷的依據(jù)是
。
