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1931．科學(xué)家培育熒光鼠的設(shè)計(jì)思路可用下面的圖解表示．
依據(jù)設(shè)計(jì)程序，回答下列問題：
（1）科學(xué)家在過程A中對天然質(zhì)粒做的修飾改造是．
（2）檢測熒光小鼠細(xì)胞內(nèi)是否含有基因X，在分子水平上通常用作探針；判斷轉(zhuǎn)基因熒光鼠熒光基因的表達(dá)是否成功，在個體水平上應(yīng)檢測．
（3）基因工程的操作步驟中其中核心的步驟是（填字母）．
（4）質(zhì)粒上的啟動子和起始密碼子的區(qū)別是．
（5）圖中熒光水母cDNA文庫屬于文庫，不含和非編碼區(qū)，（能/不能）在不同種的生物間進(jìn)行基因交流．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：4引用：1難度：0.31932．科學(xué)家已成功將蛛絲蛋白基因?qū)肷窖蚴芫?，可通過轉(zhuǎn)基因山羊分泌的乳汁來生產(chǎn)蛛絲蛋白，高強(qiáng)度的蛛絲蛋白可用于特種工業(yè)領(lǐng)域．培育該轉(zhuǎn)基因山羊的基本過程如圖，據(jù)圖回答下列問題．
（1）為保證實(shí)驗(yàn)成功，產(chǎn)生蛛絲蛋白的基因需要從（填”基因組”或”cDNA”）文庫中獲取，并與②等調(diào)控組件重組在一起，然后與載體相連建成蛛絲蛋白基因表達(dá)載體；再通過方法，將蛛絲蛋白基因表達(dá)載體導(dǎo)入山羊的受精卵中，獲得重組細(xì)胞．
（2）將獲得的重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎后，移植到經(jīng)過處理的受體母羊子宮內(nèi)．由于人們對動物細(xì)胞所需營養(yǎng)條件還沒有完全研究清楚，所以在培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中，通常需要加入等天然成分．若需要一次產(chǎn)生兩頭轉(zhuǎn)基因羊，可將早期胚胎進(jìn)行處理．
（3）綜上所述，胚胎工程是對動物的所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)．像這樣利用動物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：13引用：1難度：0.31933．BZR1蛋白是植物特有的蛋白，與植物的抗鹽性有關(guān)。研究人員通過提收胡楊細(xì)胞中編碼BZRI蛋白的基因--PeBZR1基因，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將其轉(zhuǎn)入野生型煙草細(xì)胞內(nèi)，并通過篩選獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株，觀察轉(zhuǎn)基因煙草的抗鹽能力。請回答下列問題：
（1）上述實(shí)驗(yàn)中，胡楊的PeBZR1基因可從cDNA文庫中獲取，eDNA文庫中的基因（填“含有”或“不含”）啟動子，（填“含有”或“不含”）內(nèi)含子序列。
（2）獲得PrBZAR1基內(nèi)后，可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，其原理是.
當(dāng)溫度上升到90℃以上時，兩條鏈解旋；當(dāng)溫度下降到50℃左右時，DNA單鏈與結(jié)合；當(dāng)溫度升高到72℃左右時，在酶的作用下，合成互補(bǔ)鏈。
（3）將PeBZR1基因與質(zhì)粒結(jié)合，構(gòu)建基因表達(dá)載體；基因表達(dá)載體除具有啟動子、目的基因，復(fù)制原點(diǎn)外，一般還包括（答出兩點(diǎn)）。
（4）若要判斷PeBZR1基因是否已經(jīng)插入煙草細(xì)胞染色體DNA中，可用技術(shù)進(jìn)行檢測：
若要通過實(shí)驗(yàn)判斷轉(zhuǎn)基因煙草與野生型煙草的抗鹽能力的差異，下列關(guān)于對照組和實(shí)驗(yàn)組的敘述，正確的是。
A.正常培養(yǎng)液處理轉(zhuǎn)基因煙草作為對照組，高鹽培養(yǎng)液處理轉(zhuǎn)基因煙草作為實(shí)驗(yàn)組
B.正常培養(yǎng)液處理野生型煙草作為對照組，高鹽培養(yǎng)液處理轉(zhuǎn)基因煙草作為實(shí)驗(yàn)組
C.正常培養(yǎng)液處理轉(zhuǎn)基因煙草作為對照組，高鹽培養(yǎng)液處理野生型煙草作為實(shí)驗(yàn)組
D.高鹽培養(yǎng)液處理野生型煙草作為對照組，高鹽培養(yǎng)液處理轉(zhuǎn)基因煙草作為實(shí)驗(yàn)組發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：21引用：2難度：0.71934．以山東農(nóng)業(yè)大學(xué)李鐵堅(jiān)教授為首的農(nóng)業(yè)專家總結(jié)養(yǎng)豬技術(shù)，創(chuàng)立了新式生態(tài)大棚養(yǎng)豬法，也叫懶漢養(yǎng)豬法．
（1）懶漢養(yǎng)豬法充分利用鋸末、農(nóng)作物秸稈粉碎物等作為發(fā)酵床墊料．由于豬有拱地的習(xí)性，鋸末、農(nóng)作物秸稈粉碎物等就會與豬糞便混合發(fā)酵，培養(yǎng)有益菌供豬采食，減少飼料、節(jié)約用水等直接飼養(yǎng)成本，實(shí)現(xiàn)糞污零排放，無臭氣、無污染．同時，還能生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)肥料，用于改良土壤、促進(jìn)農(nóng)作物生長，主要遵循了原理．懶漢養(yǎng)豬法使豬只恢復(fù)了自然習(xí)性，從發(fā)酵床中采食肉眼可見的大型白色菌絲．乳酸菌與該菌絲細(xì)胞相比，最主要的區(qū)別是．料床中的各種有益菌之間的關(guān)系為．在寒冷的冬季，發(fā)酵床表層的溫度仍可維持25℃-30℃的水平，主要原因是．
（2）現(xiàn)有發(fā)酵床混合菌種采自自然界，發(fā)酵效率較低．從瑞氏木霉cDNA文庫中可獲得高效的纖維素酶基因，有人將瑞氏木霉纖維素酶基因轉(zhuǎn)入混合菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用纖維素的工程混合菌菌種（過程如圖甲所示）．
（1）圖甲中，為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以作為唯一碳源．①、②過程需要重復(fù)幾次，目的是．
（2）某同學(xué)嘗試過程②的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示．該同學(xué)的接種方法是；推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：4引用：1難度：0.31935．請回答下列有關(guān)生物工程的問題：
（1）對于基因工程來說，其核心步驟是，若要培育能從乳汁中分泌人的干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，需要選擇的受體細(xì)胞是（受精卵、乳腺細(xì)胞），為了讓轉(zhuǎn)入的干擾素基因高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的和之間．
（2）植物體細(xì)胞雜交過程中，在把植物細(xì)胞雜交之前，必須用纖維素酶果膠酶去除細(xì)胞壁，雜交過程的另一個環(huán)節(jié)是；培育出諸如“番茄-馬鈴薯”這樣的雜種植株利用了植物細(xì)胞全能性的原理．胚胎干細(xì)胞也有類似的特性，并且胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生．
（3）在進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細(xì)胞進(jìn)行融合，這兩種細(xì)胞一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞，另外一種是的B細(xì)胞；體外培養(yǎng)的過程中，貼壁生長的細(xì)胞會出現(xiàn)現(xiàn)象．
（4）在“試管牛”的培育過程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進(jìn)行處理，使其，另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至期．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：4引用：1難度：0.51936．目前全球肆虐的病毒是一種以前尚未在人類中發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒，命名為2019-nCoV（以下簡稱nCoV）。它具有已知RNA病毒中最大的基因組，單鏈RNA大小為3萬個堿基左右。結(jié)構(gòu)如圖。
疫苗預(yù)防
針對該病毒現(xiàn)在還沒有具有針對性的特效藥，因此各國都寄希望于研制出針對該病毒的疫苗。疫苗分為以下5種：滅活疫苗，減毒活疫苗，重組蛋白疫苗，核酸疫苗，重組病毒載體疫苗。
（1）重組蛋白疫苗：中科院微生物所動物試驗(yàn)階段
可以讓大腸桿菌表達(dá)出nCoV的S蛋白，打進(jìn)人體，讓免疫系統(tǒng)針對該蛋白產(chǎn)生抗體。該過程需要將S蛋白基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌體內(nèi)，你認(rèn)為對該過程描述合理的是（多選）
A．用PCR可以短時間獲得大量的S蛋白基因，根據(jù)需要在基因兩端加上的限制性酶切位點(diǎn)可以不同
B．該過程的表達(dá)載體上要具有復(fù)制原點(diǎn)、起始密碼子、終止密碼子、抗生素抗性基因和S蛋白基因
C．通過Ca2+處理大腸桿菌以獲得感受態(tài)細(xì)胞，該狀態(tài)的細(xì)胞能夠提高表達(dá)載體整合到擬核上的效率
D．能夠利用大腸桿菌DNA擴(kuò)增出目的基因，說明成功導(dǎo)入了S蛋白基因，是否表達(dá)S蛋白還需要抗體檢測
（2）獲得的工程菌需要篩選才能投入疫苗的生產(chǎn)，下列于此過程有關(guān)表述正確的是（多選）
A．篩選和鑒定菌種要在培養(yǎng)基中加入瓊脂，大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上會出現(xiàn)黑色菌落
B．培養(yǎng)基配制過程要稱量、溶化、滅菌，倒平板之前調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍以利于細(xì)菌繁殖
C．如果需要計(jì)數(shù)，則用稀釋涂布平板法涂布平板之后對菌落計(jì)數(shù)，顯微鏡直接觀察值可能偏小
D．將高產(chǎn)S蛋白的菌種保存起來可以用4℃臨時保藏和-20℃甘油管藏等方法，后者保存時間長
（3）工程菌操作整個過程需要嚴(yán)格的無菌操作，下列無菌操作方式合理的有（多選）
A．每次使用接種環(huán)前后都要進(jìn)行灼燒滅菌，但是灼燒之后要置于菌液冷卻才能使用
B．液體培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌，加了瓊脂的固體培養(yǎng)基可以用干熱滅菌箱滅菌
C．操作者雙手應(yīng)該用酒精擦拭消毒，但是該過程不能完全殺死微生物的芽孢和孢子
D．倒平板凝固后要將培養(yǎng)皿倒置，目的是防止水分過快蒸發(fā)以及冷凝水回滴造成污染
（4）核酸疫苗：美國人體試驗(yàn)階段（未做動物試驗(yàn)）
將S蛋白對應(yīng)的mRNA用脂膜包裹打進(jìn)人體，讓它在細(xì)胞里表達(dá)病毒的S蛋白。以下對該方法的誤解是（多選）
A．核酸注入人體細(xì)胞只會造成體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生變化，并不影響生殖細(xì)胞
B．該過程流程大大簡化，節(jié)省了重組蛋白疫苗的生產(chǎn)S蛋白的時間
C．mRNA如果成功進(jìn)入細(xì)胞，翻譯產(chǎn)生的S蛋白就可以在細(xì)胞內(nèi)對抗病毒
D．核酸外脂膜與細(xì)胞膜融合，幫助核酸進(jìn)入細(xì)胞指導(dǎo)S蛋白的翻譯
（5）重組病毒載體疫苗：軍事科學(xué)院臨床Ⅱ期階段（動物試驗(yàn)和臨床Ⅰ期完成）
是把nCoV的部分基因植入到不致病但侵染能力很強(qiáng)的腺病毒載體里，重組成新病毒。任何疫苗在大規(guī)模使用前，最好通過動物試驗(yàn)再進(jìn)行臨床試驗(yàn)。大規(guī)模試驗(yàn)用哺乳動物一般用小鼠，但是小鼠沒有人類ACE2蛋白，因此獲得大量人源ACE2轉(zhuǎn)基因小鼠成為動物疫苗試驗(yàn)的重要步驟。在此過程中下 列表述合理的是（多選）
A．鑒于人類基因組測序已經(jīng)完成，既可以從人類基因組文庫中獲取目的基因，又可以從cDNA文庫中獲取
B．鑒于小鼠也是真核生物，既可以將人類ACE2完整的基因?qū)胄∈篌w內(nèi)，又可以導(dǎo)入無內(nèi)含子的目 的基因
C．鑒于受體細(xì)胞是小鼠的受精卵細(xì)胞，重組DNA分子導(dǎo)入最好用顯微注射的方法，該方法不適合原核生物細(xì)胞
D．如果有轉(zhuǎn)人源ACE2基因小鼠若干，要在短時間獲得大量實(shí)驗(yàn)小鼠，可用核移植的方法克隆很多小鼠發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：14引用：1難度：0.61937．如圖為cDNA文庫構(gòu)建的部分示意圖，請據(jù)圖回答：
（1）①表示過程，需要添加的原料是。
（2）①過程所用的酶與所有的DNA聚合酶相似，不能，需要添加引物。由于大多數(shù)真核生物的mRNA3′端為多聚腺苷酸，因此，可以設(shè)計(jì)以為引物。
（3）②、③過程表示用大腸桿菌 RNase把DNA-RNA雜交分子中的RNA鏈降解成許多片段，以殘余的RNA為引物合成互補(bǔ)鏈，并經(jīng)過一系列過程去除中間的引物，由此形成的互補(bǔ)鏈處于間斷狀態(tài)，所以④過程須添加酶，形成端帶有小段RNA的雙鏈cDNA。
（4）cDNA可以用PCR技術(shù)擴(kuò)增，一般設(shè)計(jì)長度在15-30個堿基之間的種引物，引物過長，會導(dǎo)致與模板DNA的雜交效率下降，使PCR的反應(yīng)效率。PCR時，預(yù)變性設(shè)置的時間明顯長于變性時間，目的是。發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：2引用：1難度：0.71938．絞股藍(lán)細(xì)胞中含有抗煙草花葉病毒（TMV）基因，可以合成一種抗TMV 蛋白，葉片對TMV 具有抗感染性．煙草是具有重要經(jīng)濟(jì)價值的雙子葉植物，由于TMV 的感染會導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)．研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV 的煙草，主要流程如圖所示．
（1）理論上，基因組文庫含有生物的基因；而cDNA 文庫中含有生物的基因．
（2）科學(xué)家從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取抗TMV 基因轉(zhuǎn)錄的RNA，然后合成目的基因．圖中①過程表示．
（3）④過程將重組Ti 質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細(xì)胞的常用方法是．
（4）由圖分析，在過程③構(gòu)建的重組Ti 質(zhì)粒上應(yīng)該含有的標(biāo)記基因是基因，它的作用是．
（5）過程⑥可采取的方法，檢測植株是否合成了抗TMV 蛋白．在個體水平的鑒定過程中，可通過的方法來確定植株是否具有抗性．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：9引用：1難度：0.31939．除草劑的有效成分草甘膦能夠?qū)Ｒ恍缘匾种艵PSP合酶的活性，從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而導(dǎo)致植物死亡。草甘膦沒有選擇性，它在除掉雜草的同時也會使作物受損。解決這個問題的方法之一就是培育抗草甘膦的作物，下列關(guān)于轉(zhuǎn)入外源EPSP合酶基因使矮牽?？共莞熟⒘鞒痰臄⑹鲥e誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：13引用：2難度：0.71940．玉米作為一種重要的經(jīng)濟(jì)作物，被廣泛用于食品、飼料、工業(yè)和新能源產(chǎn)業(yè)。科技工作者采用基因工程技術(shù)，成功將抗蟲基因?qū)胗衩祝嘤鼍哂锌瓜x性狀的優(yōu)良品種。請回答下列問題：
（1）已知抗蟲基因來自于cDNA 文庫，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時（填“需要”或“不需要”）在目的基因的首端添加啟動子，原因是。請寫出啟動子的作用：。
（2）將切傷后的玉米胚芽尖端浸泡在含有抗蟲基因的農(nóng)桿菌菌液中10分鐘，插入玉米萌發(fā)培養(yǎng)基，在黑暗條件下培養(yǎng)3 天即可獲得幼苗。對芽尖進(jìn)行切傷處理的目的是。由玉米胚芽尖端組織能夠培育出幼苗，體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有。
（3）抗蟲基因?qū)胗衩缀?，能否賦予其抗蟲特性，最終需要進(jìn)行水平的抗蟲接種實(shí)驗(yàn)。在確認(rèn)玉米已經(jīng)獲得抗蟲性狀后，可通過方法獲得穩(wěn)定遺傳的品種。發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：11引用：1難度：0.7
