科研人員通過(guò)設(shè)計(jì)來(lái)自小鼠腸道的天然大腸桿菌,然后將修飾過(guò)的工程原生細(xì)菌植入小鼠體內(nèi)后誘導(dǎo)了持續(xù)性的生理變化,從而改善了動(dòng)物糖尿病等慢性病病理狀態(tài)。研究人員首先從實(shí)驗(yàn)小鼠的糞便樣本中提取出天然大腸桿菌,并從中鑒定出一種遺傳上易馴化的菌株,然后通過(guò)基因工程修飾使其表達(dá)了在膽汁酸代謝中具有重要作用的膽汁鹽水解酶(BSH),將經(jīng)過(guò)修飾的天然細(xì)菌重新植入小鼠腸道。進(jìn)行一次治療后,研究人員在小鼠的整個(gè)腸道中都發(fā)現(xiàn)了帶有BSH基因的大腸桿菌,它們?cè)谒拗鞯恼麄€(gè)生命周期中都保持著B(niǎo)SH活性,BSH活性對(duì)治療小鼠糖尿病產(chǎn)生積極影響?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)如圖是大腸桿菌的質(zhì)粒和通過(guò)R-PCR技術(shù)合成的BSH基因(目的基因),進(jìn)行體外拼接時(shí),不能選擇限制酶A,理由是
限制酶A能破壞氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因
限制酶A能破壞氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因
;選用限制酶B和酶C切割質(zhì)粒和目的基因的優(yōu)點(diǎn)有 保證目的基因與質(zhì)粒的正確連接和防止目的基因自身環(huán)化
保證目的基因與質(zhì)粒的正確連接和防止目的基因自身環(huán)化
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(2)導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌需進(jìn)行篩選后方可應(yīng)用于臨床治療,簡(jiǎn)要說(shuō)明重組大腸桿菌篩選的思路:將重組大腸桿菌接種于含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,分別挑取不同菌落接種到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,不能生長(zhǎng)的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌
將重組大腸桿菌接種于含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,分別挑取不同菌落接種到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,不能生長(zhǎng)的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌
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(3)若科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù),研制出了新的BSH,與天然BSH相比,其效果更好,起效快,更好保存。獲得BSH基因的途徑是;從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)
設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)
→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列
找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列
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