研究發(fā)現(xiàn),H5亞型禽流感病毒能突破種間屏障感染人類??蒲腥藛T針對人流感病毒H3以及禽流感病毒H5進(jìn)行了相關(guān)研究?;卮鹣铝袉栴}:
(1)科研人員要通過PCR擴(kuò)增兩種病毒的DNA前,首先要通過兩種病毒的RNA得到兩種病毒的DNA,這一步驟所需的關(guān)鍵酶是
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
。PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA的過程中,復(fù)性是指 當(dāng)溫度下降到50℃左右,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
當(dāng)溫度下降到50℃左右,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
。PCR中需要添加引物的原因是 DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端(子鏈的5′端)開始延伸DNA
DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端(子鏈的5′端)開始延伸DNA
。
(2)研究人員利用p質(zhì)粒構(gòu)建p-H5/H3共表達(dá)的重組質(zhì)粒(如圖),設(shè)計思路是:先將H5基因整合到p質(zhì)粒(僅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位點)上,再將H3基因插入,獲得重組質(zhì)粒。為達(dá)到實驗?zāi)康?,需要在目的基因兩端引入酶切位點,在H5基因兩端需要引入哪些酶切位點?NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ
NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ
。
(3)重組質(zhì)粒p-H5/H3中的啟動子是 RNA聚合
RNA聚合
酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。除圖中所示的組成外,重組質(zhì)粒p-H5/H3中還應(yīng)有 終止子、標(biāo)記基因
終止子、標(biāo)記基因
等(至少答兩個)。
(4)研究人員將重組質(zhì)粒p-H5/H3直接導(dǎo)入人或動物體內(nèi),讓其在宿主細(xì)胞中表達(dá)出抗原蛋白,不斷進(jìn)行體液免疫和細(xì)胞免疫,達(dá)到預(yù)防的目的。上述研究表明,通過將 多個抗原基因插入同一個質(zhì)粒中
多個抗原基因插入同一個質(zhì)粒中
,可以實現(xiàn)一種基因疫苗預(yù)防多種疾病的目的。