中科院動物研究所利用CRISPR/Cas9技術,向豬的基因組內插入一個解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)經過基因改造的豬瘦肉率高、脂肪少、抗寒能力強。如圖是基因改造過程中涉及的相關限制酶及酶切位點。請回答下列問題:

(1)圖中的抗生素抗性基因的作用是作為 標記標記基因,以便于篩選。為了獲取重組質粒,除了使用限制酶外,還需使用 DNA連接DNA連接酶。
(2)重組質粒上應有 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結合的部位,以驅動解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)轉錄,該部位稱為 啟動子啟動子。
(3)在構建基因表達載體過程中,為避免出現(xiàn)質粒和目的基因自身環(huán)化,常用 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時切割質粒和UCP1基因。
(4)獲得目的基因后,常采用PCR技術擴增目的基因,在此過程中,由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA單鏈,只能從 3′3′端延伸DNA單鏈,因此需要加入引物。
(5)科研人員通過 顯微注射顯微注射法,將基因表達載體導入豬的受精卵中??赏ㄟ^ DNA分子雜交DNA分子雜交技術,來檢測UCP1基因是否已導入到豬受精卵細胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】標記;DNA連接;RNA聚合酶;啟動子;BamHⅠ和HindⅢ;3′;顯微注射;DNA分子雜交
【解答】
【點評】
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