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圖中甲表示含目的基因的DNA片段,圖乙表示質(zhì)粒(已知PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ三種限制酶切割后產(chǎn)生的黏性末端都不相同)。請回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)已知DNA的合成方向總是從子鏈的5'端向3'端延伸。利用PCR技術(shù)以圖甲中的DNA片段為模板擴增目的基因,需要的引物有
B、C
B、C
(從A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇)。利用PCR擴增目的基因的過程由高溫變性(90~95℃),低溫復(fù)性(55~60℃)、適溫延伸(70~75℃)三個步驟構(gòu)成一個循環(huán),為使得DNA聚合酶能夠重復(fù)利用,選用的酶應(yīng)在
90~95
90~95
℃處理后仍然具備催化活性。
(2)要保證目的基因能與圖乙中的質(zhì)粒準接,要將(1)中選出的兩種引物的5'端分別添加
PstⅠ
PstⅠ
、
EcoRⅠ
EcoRⅠ
兩種限制酶的識別序列。在此基礎(chǔ)上,對擴增的目的基因和質(zhì)粒都用這兩種限制酶處理,待基因表達載體構(gòu)建完成后,加入含大腸桿菌的轉(zhuǎn)化液中。含該重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落
不能
不能
(填“能”或者“不能”)在含青霉素培養(yǎng)基存活。
(3)若要將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌,則一般先要用Ca2+處理大腸桿菌,目的是使大腸桿菌處于一種
吸收周圍環(huán)境中DNA分子
吸收周圍環(huán)境中DNA分子
生理狀態(tài)。
(4)基因工程的應(yīng)用十分廣闊,可用轉(zhuǎn)基因牛制作乳腺生物反應(yīng)器,從乳汁中提取藥物,則該操作過程中選擇的受體細胞是
牛的受精卵
牛的受精卵
,原因是
動物受精卵具有全能性
動物受精卵具有全能性
。

【答案】B、C;90~95;PstⅠ;EcoRⅠ;不能;吸收周圍環(huán)境中DNA分子;牛的受精卵;動物受精卵具有全能性
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/7 8:0:9組卷:9引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
    、
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細胞中特異性表達.
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     

    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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