科研人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將大麥黃矮病毒的復(fù)制酶基因(R基因)導(dǎo)入小麥植株,培育出抗病毒植株。實(shí)驗(yàn)流程如圖,回答下列問題。
(1)RT-PCR技術(shù)是RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄為互補(bǔ)DNA后,再以此為模板通過PCR進(jìn)行擴(kuò)增。RT-PCR反應(yīng)體系中加入的原料是 4種脫氧核苷酸4種脫氧核苷酸。在設(shè)計(jì)一對(duì)引物時(shí),科研人員在引物序列中增加了與質(zhì)粒上相同的某限制酶的識(shí)別序列,其目的是 用該限制酶同時(shí)處理目的基因序列和質(zhì)粒,使兩者產(chǎn)生相同的黏性末端用該限制酶同時(shí)處理目的基因序列和質(zhì)粒,使兩者產(chǎn)生相同的黏性末端,便于構(gòu)建基因表達(dá)載體。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),只采用一種限制酶既會(huì)產(chǎn)生R基因與質(zhì)粒之間正向連接也會(huì)產(chǎn)生反向連接??蒲腥藛T選取反向連接的基因表達(dá)載體進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),能取得良好的抗病毒效果,從基因表達(dá)的過程分析,其原因可能是反向插入的目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA與病毒RNA互補(bǔ)配對(duì),抑制病毒RNA的生理功能反向插入的目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA與病毒RNA互補(bǔ)配對(duì),抑制病毒RNA的生理功能。
(3)圖中①過程是 再分化再分化,此過程中關(guān)鍵激素生長(zhǎng)素和 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素的濃度、比例會(huì)影響愈傷組織的發(fā)育方向。
(4)圖中②過程在分子水平檢測(cè)幼苗是否含有目的基因時(shí),需要提取幼苗的DNA并進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。提取過程中為了將DNA與蛋白質(zhì)初步分離,使用酒精的原理是 DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精。進(jìn)行個(gè)體水平的鑒定時(shí),簡(jiǎn)要的操作是 在轉(zhuǎn)基因幼苗上接種大麥黃矮病毒,一段時(shí)間后觀察轉(zhuǎn)基因幼苗的生理狀況在轉(zhuǎn)基因幼苗上接種大麥黃矮病毒,一段時(shí)間后觀察轉(zhuǎn)基因幼苗的生理狀況。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】4種脫氧核苷酸;用該限制酶同時(shí)處理目的基因序列和質(zhì)粒,使兩者產(chǎn)生相同的黏性末端;反向插入的目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA與病毒RNA互補(bǔ)配對(duì),抑制病毒RNA的生理功能;再分化;細(xì)胞分裂素;DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精;在轉(zhuǎn)基因幼苗上接種大麥黃矮病毒,一段時(shí)間后觀察轉(zhuǎn)基因幼苗的生理狀況
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:1難度:0.6
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(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
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(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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