科學家將人的α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)基因與綿羊乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,成功地培育出能表達α1-AT的轉(zhuǎn)基因綿羊,這標志著乳腺生物反應(yīng)器的實用性研究進入醫(yī)學臨床應(yīng)用。回答下列問題:
(1)從人的胸腺組織細胞中提取到α1-AT的mRNA,通過反轉(zhuǎn)錄獲得α1-AT基因,與人體細胞內(nèi)基因的結(jié)構(gòu)相比,該方法得到的基因不具有 啟動子、終止子、內(nèi)含子等啟動子、終止子、內(nèi)含子等(答兩點)等。為獲得更多的α1-AT基因,可利用PCR技術(shù)進行擴增,該技術(shù)需要 22種引物,引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸。
(2)科學家將α1-AT基因與綿羊乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,再與質(zhì)粒構(gòu)建成重組表達載體,而不是將α1-AT基因直接導(dǎo)入綿羊受精卵中,原因是 使a-AT基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在并可遺傳,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用,若直接將其導(dǎo)入受體細胞,很可能會被降解使a-AT基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在并可遺傳,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用,若直接將其導(dǎo)入受體細胞,很可能會被降解。表達載體中啟動子的作用是 (RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位)能驅(qū)動a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得a-AT(RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位)能驅(qū)動a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得a-AT。
(3)將重組基因表達載體導(dǎo)入綿羊受精卵中,置于早期胚胎培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)。早期胚胎進行移植前,需進行性別鑒定,若要在囊胚期鑒定性別,則操作思路是 取滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定取滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定。胚胎移植的實質(zhì)是 早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。
(4)轉(zhuǎn)基因綿羊成年后需對其體內(nèi)α1-AT基因表達產(chǎn)物進行檢測,一般采用抗原—抗體雜交法,若出現(xiàn) 雜交帶雜交帶,則表明α1-AT基因成功表達,轉(zhuǎn)基因綿羊培育成功。
【考點】基因工程的操作過程綜合;基因工程的原理.
【答案】啟動子、終止子、內(nèi)含子等;2;使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸;使a-AT基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在并可遺傳,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用,若直接將其導(dǎo)入受體細胞,很可能會被降解;(RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位)能驅(qū)動a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得a-AT;取滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定;早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移;雜交帶
【解答】
【點評】
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