紅豆杉富含紫杉醇，是一種重要的抗癌藥物。請回答與紅豆杉組織培養(yǎng)及轉基因有關的問題：
（1）在進行紅豆杉愈傷組織誘導和培養(yǎng)時，最好取春季新長出的莖葉，經(jīng)消毒消毒處理后才能接種到誘導培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。形成的愈傷組織細胞在顯微鏡下觀察通常是不定形態(tài)的，原因是細胞壁薄細胞壁薄。為增加愈傷組織的數(shù)量，可以將培養(yǎng)瓶中的愈傷組織切下，接種至新的相同培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)。
（2）可從固體培養(yǎng)基中篩選生長良好的愈傷組織，接種至含液體培養(yǎng)基的三角瓶中在搖床上振蕩培養(yǎng)，細胞的生長速度和紫杉醇含量和培養(yǎng)的溫度、pH、光照條件、培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)及細胞遺傳特性有關外，還受振蕩速度或氣體濃度振蕩速度或氣體濃度的影響。在植物細胞不斷再培養(yǎng)的過程中容易發(fā)生染色體畸變染色體畸變（可遺傳變異類型）等變化，這會導致細胞全能性的喪失。
（3）將外源基因導入植物細胞有多種途徑：以經(jīng)改造的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒為載體載體，通過寄主感染受體植物的途徑將外源基因轉入受體細胞；也可通過顯微注射法顯微注射法將外源基因直接導入受體細胞；還可以將外源DNA包裹在人工合成的脂質(zhì)體中，通過與原生質(zhì)體原生質(zhì)體融合完成細胞的轉化。
【答案】消毒；細胞壁??；繼代培養(yǎng)；振蕩速度或氣體濃度；染色體畸變；載體；顯微注射法；原生質(zhì)體
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：26引用：1難度：0.7
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1．某同學在學習“細胞工程”時，列表比較了動植物細胞工程的有關內(nèi)容，你認為有幾處不正確（ ?。?br />
植物細胞工程 動物細胞工程 技術手段 植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等 動物細胞培養(yǎng)和融合等 特殊處理 酶解法去除細胞壁 胃蛋白酶處理得到細胞懸浮液 融合方法 物理方法、化學方法、生物方法 物理方法、化學方法和生物方法 典型應用 無病毒植物的培育、人工種子、種間植物雜交等 單克隆抗體的制備等 培養(yǎng)基區(qū)別 所用的糖必須為葡萄糖 所用的糖為葡萄糖且動物血清不可缺少 發(fā)布：2024/5/27 14:0:0組卷：14引用：4難度：0.7 -
2．雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，廣泛用于動物領域的抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因，構建重組質(zhì)粒，導入煙草，以獲得抗病毒煙草?；卮饐栴}：
（1）已知雞干擾素基因的核苷酸序列，則可采用方法獲得目的基因，對其進行克隆常采用技術。
（2）重組質(zhì)粒中應有RNA聚合酶識別和結合的部位，該部位稱為。
（3）由于細胞壁的存在，植物的組織培養(yǎng)和克隆有一定的難度，故常用（方法）將重組質(zhì)粒導入煙草細胞的，再進行培養(yǎng)。待重新長出細胞壁，形成胚性細胞，此時，應該培養(yǎng)基中甘露醇的濃度，以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團，然后經(jīng)兩條途徑形成轉基因煙草植株。該轉基因煙草植株在多次繼代培養(yǎng)后，會（“保持”或“喪失”）細胞全能性的表達。
（4）若轉基因煙草植株對病毒的侵染表現(xiàn)出一定的抗性，但抗性較低，可能原因是。發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：28引用：1難度：0.7 -
3．回答與基因工程和植物克隆有關的問題：
HIV感染已成為威脅人類健康及社會發(fā)展的主要問題之一，臨床實驗證實，HIV殼體蛋白病毒樣顆粒能夠刺激機體產(chǎn)生特異的體液和細胞免疫。植物表達系統(tǒng)屬于真核細胞表達系統(tǒng)，利用植物生產(chǎn)重組蛋白具有很多優(yōu)點，包括：降低攜帶動物性病原體的危險性，易于純化，不需特殊的運輸和儲藏條件，植物培養(yǎng)基價格低廉降低生產(chǎn)成本等，因此被認為是一個比微生物或動物更理想的蛋白生產(chǎn)系統(tǒng)。科學家們將經(jīng)過改造的融合基因轉入枸杞細胞，建立利用轉基因枸杞根系分泌表達特定HIV殼體蛋白的反應系統(tǒng)。
（1）通過長期研究后，科學家已經(jīng)測定該融合基因的堿基序列，下面為利用PCR儀進行PCR的操作步驟請完善相關步驟內(nèi)容。
a.按配方準備好各組分。
b.用微量移液器依次加入各組分。
c.進行，使反應液集中在微量離心管底部。
（2）若采用農(nóng)桿菌轉化法導入目的基因，需先將融合基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中，再通過農(nóng)桿菌的侵染將重組DNA分子轉入枸杞細胞中。此過程中影響轉化效率的因素除了溫度、培養(yǎng)時間等環(huán)境因素外還有、。（答出2點即可）將成功導入目的基因的枸杞細胞進行植物組織培養(yǎng)前需將其轉入添加的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以除去附著的農(nóng)桿菌。枸杞根系分泌表達HIV殼體蛋白的缺點是根系的生長較為緩慢，為了獲得大量表達產(chǎn)物，可以對相應細胞進行。
（3）枸杞植株在多次繼代培養(yǎng)后可能會喪失細胞全能性的表達能力，可能是由于細胞或組織中的被打破，或細胞對發(fā)生改變。發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：25引用：1難度：0.7
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