類產(chǎn)堿假單胞菌殺蟲蛋白不易被蝗蟲體內(nèi)蛋白酶降解,是一種安全的細(xì)菌殺蟲蛋白。某研究小組將類產(chǎn)堿假單胞菌殺蟲蛋白基因(ppip)導(dǎo)入牧草中獲得了抗蝗蟲牧草品種。
(1)ppip基因,還有一些抗病基因,抗除草劑基因等都是用來提高植物的抗逆抗逆能力。該研究小組檢查基因工程是否做成功的一步是目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定,其中目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因。
(2)如圖1是該研究小組設(shè)計的T-DNA元件示意圖。
①攜帶ppip的T-DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;T-DNA發(fā)揮的功能是將攜帶的ppip轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上將攜帶的ppip轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。
②將被檢材料用含有底物(X-Gluc)的緩沖液浸泡,若組織細(xì)胞表達(dá)出GUS,該酶就可將X-Gluc水解生成藍(lán)色產(chǎn)物,從而使被檢材料顯藍(lán)色,如圖2所示。
研究發(fā)現(xiàn)天然植物體內(nèi)無GUS,根據(jù)T-DNA元件示意圖,請思考gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因)在植物基因表達(dá)載體中作為標(biāo)記基因標(biāo)記基因;選取該基因的原理是天然植物體內(nèi)無GUS,不能催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物;若目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,與其相連的標(biāo)記基因表達(dá)的GUS可催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。因此可以通過有無藍(lán)色產(chǎn)物來鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。天然植物體內(nèi)無GUS,不能催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物;若目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,與其相連的標(biāo)記基因表達(dá)的GUS可催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。因此可以通過有無藍(lán)色產(chǎn)物來鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】抗逆;目的基因的檢測與鑒定;檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;將攜帶的ppip轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上;標(biāo)記基因;天然植物體內(nèi)無GUS,不能催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物;若目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,與其相連的標(biāo)記基因表達(dá)的GUS可催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。因此可以通過有無藍(lán)色產(chǎn)物來鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。
【解答】
【點評】
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