試卷征集
加入會員
操作視頻

科研人員研究調(diào)控蔗糖轉(zhuǎn)移酶基因(SUC2)的兩種蛋白質(zhì)Snf1和Snf2之間的相互作用的原理如下:真核細胞起始基因轉(zhuǎn)錄需要有轉(zhuǎn)錄激活因子的參與。酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4在結(jié)構(gòu)上是組件式的,由DNA結(jié)構(gòu)功能域(BD)和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(AD)組成。兩個結(jié)構(gòu)域分開時不能激活轉(zhuǎn)錄,只有當(dāng)兩者空間上接近時,才具有GAL4轉(zhuǎn)錄因子活性。BD與基因上游激活序列UAS結(jié)合后,激活A(yù)D與啟動子結(jié)合,使啟動子下游基因轉(zhuǎn)錄。如圖1為研究相互作用的X蛋白和Y蛋白的機制模式圖。
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)操作中,需要用
限制酶和DNA連接
限制酶和DNA連接
酶將目的基因分別插入到酵母表達載體中,得到兩種融合表達載體(如2圖)。酶切時通常選用兩種不同的酶,這樣做的目的是
產(chǎn)生不同的黏性末端,保證目的基因按正確的方向連接;防止自身環(huán)化
產(chǎn)生不同的黏性末端,保證目的基因按正確的方向連接;防止自身環(huán)化

(2)酵母染色體上能被GAL4激活轉(zhuǎn)錄,顯示兩種蛋白質(zhì)相互作用的基因稱為報告基因。若用AUR1-C(抗生素AbA抗性基因)和HIS3(組氨酸合成基因)作為報告基因,那么作為被轉(zhuǎn)化的酵母細胞在抗生素抗性和營養(yǎng)需求上應(yīng)滿足的條件是
無AbA抗性、組氨酸缺陷
無AbA抗性、組氨酸缺陷
。轉(zhuǎn)化后需要在添加
AbA和不含組氨酸
AbA和不含組氨酸
的培養(yǎng)基上培養(yǎng)篩選。除此之外,還要將酵母的GAL4基因敲除,原因是
排除細胞內(nèi)源轉(zhuǎn)錄因子GAL4的影響
排除細胞內(nèi)源轉(zhuǎn)錄因子GAL4的影響
。
(3)LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍色物質(zhì),使菌落呈現(xiàn)藍色;否則菌落為白色。科研人員采用LacZ作為報告基因,根據(jù)上述原理,驗證了蛋白質(zhì)Snf1和Snf2之間存在相互作用。寫出實驗思路并預(yù)期結(jié)果及推論。

【答案】限制酶和DNA連接;產(chǎn)生不同的黏性末端,保證目的基因按正確的方向連接;防止自身環(huán)化;無AbA抗性、組氨酸缺陷;AbA和不含組氨酸;排除細胞內(nèi)源轉(zhuǎn)錄因子GAL4的影響
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:27引用:4難度:0.7
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     

    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者:深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司| 應(yīng)用名稱:菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本:5.0.7 |隱私協(xié)議|第三方SDK|用戶服務(wù)條款
本網(wǎng)部分資源來源于會員上傳,除本網(wǎng)組織的資源外,版權(quán)歸原作者所有,如有侵犯版權(quán),請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù),本網(wǎng)將在三個工作日內(nèi)改正