EV71是引發(fā)手足口病的一種人腸道病毒。為制備抗EV71的單克隆抗體,科研人員用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
(1)將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2作為抗原抗原分別注射到3組小鼠體內(nèi),引發(fā)小鼠機(jī)體的體液體液免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。
(2)多次免疫后,分別取上述3組小鼠的血清和未免疫小鼠血清,測(cè)定抗體與抗原的結(jié)合強(qiáng)度,結(jié)果如圖所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗體不是不是(填“是”或“不是”)單一抗體,判斷依據(jù)是EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原。
②測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度,目的是排除抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
③制備抗EV71單克隆抗體時(shí),選用VP1VP1免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳,依據(jù)是第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒(和VP1蛋白),第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒,僅能結(jié)合VP2第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒(和VP1蛋白),第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒,僅能結(jié)合VP2。
(3)取相應(yīng)免疫組小鼠的脾臟,剪碎并用胰蛋白胰蛋白酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞,用滅活的病毒誘導(dǎo),與骨髓瘤骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選獲得5個(gè)不同的雜交瘤細(xì)胞株。
(4)雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生單一抗體既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生單一抗體。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】抗原;體液;不是;EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原;抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果;VP1;第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒(和VP1蛋白),第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒,僅能結(jié)合VP2;胰蛋白;骨髓瘤;既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生單一抗體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:10引用:1難度:0.8
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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