非細胞合成技術是一種運用合成生物學方法，在細胞外構建多酶催化體系，獲得目標產(chǎn)物的新技術，其核心是各種酶基因的挖掘、表達等。中國科學家設計了4步酶促反應的非細胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以期解決高溫強酸水解方法造成的嚴重污染問題，并可以提高產(chǎn)率。
回答下列問題：
（1）研究人員采用PCR技術從土壤微生物基因組中擴增得到目標酶基因。此外，獲得酶基因的方法還有 基因文庫中獲取和人工合成法基因文庫中獲取和人工合成法。（答出兩種即可）
（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時必須除去蛋白，方法有 鹽析法、酶解法或高溫變性法等鹽析法、酶解法或高溫變性法等。（答出兩種即可）
（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細胞、pET20b為表達載體分別進行4種酶的表達。表達載體轉化大腸桿菌時，首先應制備 感受態(tài)感受態(tài)細胞。為了檢測目的基因是否成功表達出酶蛋白，需要采用的方法有 抗原-抗體雜交法抗原-抗體雜交法。
（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個反應體系。若這些酶最適反應條件不同，可能導致的結果是 有的酶失活而使反應中斷有的酶失活而使反應中斷。在分子水平上，可以通過改變 基因的堿基序列基因的堿基序列，從而改變蛋白質(zhì)的結構，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因文庫中獲取和人工合成法；鹽析法、酶解法或高溫變性法等；感受態(tài)；抗原-抗體雜交法；有的酶失活而使反應中斷；基因的堿基序列
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/9 8:0:8組卷：327引用：8難度：0.6
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1．紅細胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團隊采用基因工程培育轉基因羊作為乳腺生物反應器，使其能合成EPO。下列有關敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟收入。我國科研團隊研究了一種轉基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結構和獲得轉基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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