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CAR—T細(xì)胞療法是通過設(shè)計(jì)CAR基因,并導(dǎo)入癌癥患者的T細(xì)胞中,使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細(xì)胞,CAR-T細(xì)胞膜上的CAR蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后,激活CAR-T細(xì)胞使其增殖、分化,從而實(shí)現(xiàn)對癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶,主要過程如下圖。
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請回答:
(1)要獲取CAR基因,可采取PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增,前提是
CAR基因序列已知
CAR基因序列已知
。
(2)連接形成pCDH—CAR上除了目的基因外,還有一些必須的部分,比如啟動(dòng)子和終止子,其中啟動(dòng)子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)。
(3)完成過程②常用方法是
顯微注射
顯微注射
法。此外,還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中,將CAR基因整合到T細(xì)胞的
染色體DNA
染色體DNA
上。
(4)檢測CAR-T細(xì)胞中的CAR基因是否表達(dá)了所采用的方法是
抗原-抗體雜交技術(shù)
抗原-抗體雜交技術(shù)
。
(5)在將CAR-T細(xì)胞輸給病人進(jìn)行治療之前,還需在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)。體外培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外,一般還需添加
動(dòng)物血清
動(dòng)物血清
等天然成分。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】CAR基因序列已知;RNA聚合酶;顯微注射;染色體DNA;抗原-抗體雜交技術(shù);動(dòng)物血清
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/21 8:0:10組卷:1引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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