當(dāng)今社會倡導(dǎo)以綠色為核心的生態(tài)發(fā)展觀,綠色農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)是人們健康生活的源頭。為降解農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥(馬拉硫磷)殘留,科學(xué)家用基因工程技術(shù)生產(chǎn)了CarE(羧酸酯酶)制劑,生產(chǎn)過程如圖所示。
(1)提取抗馬拉硫磷小菜蛾總RNA,經(jīng)①逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)過程獲得總cDNA,利用PCR技術(shù)可以選擇性擴增CarE基因的cDNA,原因是 引物是根據(jù)CarE基因的已知序列來設(shè)計的(或引物能特異性結(jié)合CarE基因的cDNA)引物是根據(jù)CarE基因的已知序列來設(shè)計的(或引物能特異性結(jié)合CarE基因的cDNA)。
(2)與從基因組文庫中獲得的基因相比,經(jīng)①②得到的CarE基因不能直接用于構(gòu)建基因表達載體,原因是 經(jīng)①②得到的CarE基因不具有啟動子和終止子經(jīng)①②得到的CarE基因不具有啟動子和終止子。在③過程中,要用CaCl2處理大腸桿菌,使其變成 感受態(tài)感受態(tài)細胞;得到大腸桿菌工程菌后,若要檢驗CarE基因是否成功表達,可以采用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術(shù),若沒有出現(xiàn)相應(yīng)的雜交帶,則需要用 帶標(biāo)記的目的基因帶標(biāo)記的目的基因作探針檢驗?zāi)康幕蚴欠褶D(zhuǎn)錄出mRNA。
(3)若經(jīng)以上過程得到的CarE制劑效果不理想,則可以用蛋白質(zhì)技術(shù),通過 基因修飾基因修飾,間接實現(xiàn)對CarE的改造,以滿足生產(chǎn)和生活的需求。假如請你為CarE(羧酸酯酶)制劑設(shè)計產(chǎn)品說明書,你認為在保存以及使用上應(yīng)注意哪些事項?(寫出1點,合理即可) 0-4℃低溫保存或配制溶液時應(yīng)注意溫度及pH0-4℃低溫保存或配制溶液時應(yīng)注意溫度及pH。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄);引物是根據(jù)CarE基因的已知序列來設(shè)計的(或引物能特異性結(jié)合CarE基因的cDNA);經(jīng)①②得到的CarE基因不具有啟動子和終止子;感受態(tài);抗原—抗體雜交;帶標(biāo)記的目的基因;基因修飾;0-4℃低溫保存或配制溶液時應(yīng)注意溫度及pH
【解答】
【點評】
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