單克隆抗體因其靶向性強、特異性好等顯著優(yōu)點,在實踐中應(yīng)用廣泛,我國首個自主知識產(chǎn)權(quán)的抗新冠特效藥:安巴韋單抗和羅米司韋單抗獲批,標(biāo)志著中國全自主研發(fā)的抗新冠特效藥問世。
(1)單克隆抗體的制備過程一般是利用已免疫小鼠的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合獲得的雜交瘤細(xì)胞來制備的,常用的融合方法有 PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法(寫出兩種)。
(2)鼠源單克隆抗體進入人體后,會使人體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng),導(dǎo)致該抗體失效。目前有多種技術(shù)可以解決抗體失效問題,如從雜交瘤細(xì)胞中提取編碼鼠源單克隆抗體 5區(qū)5區(qū)(填“5區(qū)”或“6區(qū)”,抗體的結(jié)構(gòu)如圖所示)序列的基因,與從人體中獲得的編碼抗體 6區(qū)6區(qū)(填“5區(qū)”或“6區(qū)”)的基因進行拼接,然后導(dǎo)入骨髓瘤細(xì)胞中,進行培養(yǎng)獲得新的抗體。
(3)還可以采用相關(guān)技術(shù)破壞小鼠內(nèi)源免疫球蛋白(Ig)基因,利用人免疫球蛋白(Ig)基因構(gòu)建表達載體導(dǎo)入鼠受精卵,再將篩選后的受體細(xì)胞進行體外胚胎培養(yǎng)。為了提高胚胎的利用率,一般會對囊胚階段的胚胎進行 (胚胎)分割(胚胎)分割處理,要注意將 內(nèi)細(xì)胞團均等分割內(nèi)細(xì)胞團均等分割。處理后的胚胎需要移植到同種、生理狀態(tài)相同(同期發(fā)情)生理狀態(tài)相同(同期發(fā)情)的代孕母鼠體內(nèi),移植的胚胎能夠在受體子宮內(nèi)存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是 受體不會對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)受體不會對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。受體經(jīng)分娩后培育、篩選獲得能產(chǎn)生 人免疫球蛋白人免疫球蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠,然后利用該小鼠進行單克隆抗體制備。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法;5區(qū);6區(qū);(胚胎)分割;內(nèi)細(xì)胞團均等分割;生理狀態(tài)相同(同期發(fā)情);受體不會對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng);人免疫球蛋白
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:15引用:1難度:0.7
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細(xì)胞和低表達CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是( ?。?br />
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3.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團隊對鼠源單克隆抗體F進行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進行替換,再構(gòu)建表達載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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