研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科學(xué)家培育出轉(zhuǎn)人溶菌酶基因山羊,以大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶(從乳汁中提取),過(guò)程如圖所示。其中編號(hào)①~⑨表示過(guò)程;質(zhì)粒S中的基因Leu通過(guò)控制相關(guān)酶的合成而影響亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊細(xì)胞維持生命活動(dòng)必不可少的一種必需氨基酸),基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見(jiàn)下表。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
限制酶 | BamH | Bgl | Hind | Xba |
識(shí)別序列和切割位點(diǎn) | G↓GATCC | A↓GATCT | A↓AGCTT | T↓CTAGA |
(1)物質(zhì)A控制溶菌酶的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段,涉及的場(chǎng)所主要有
細(xì)胞核和核糖體
細(xì)胞核和核糖體
。(2)過(guò)程①通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增物質(zhì)A,需要的酶是
Taq酶
Taq酶
;過(guò)程②需要的限制酶是 BamHⅠ、HindⅡ
BamHⅠ、HindⅡ
;過(guò)程③需要的酶是限制酶和 DNA連接酶
DNA連接酶
。(3)為成功篩選出含重組質(zhì)粒T的成纖維細(xì)胞,質(zhì)粒S中用作標(biāo)記基因的是
基因Leu
基因Leu
和 基因GFP
基因GFP
。為達(dá)到篩選目的,培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分中應(yīng)不含有 亮氨酸
亮氨酸
。將成纖維細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察,篩選出 不顯示
不顯示
(選填“顯示”或“不顯示”)綠色熒光的細(xì)胞用于過(guò)程⑤。(4)過(guò)程④常用
顯微注射
顯微注射
法,過(guò)程⑨為 胚胎移植
胚胎移植
圖中早期胚胎的 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
(結(jié)構(gòu))將發(fā)育成轉(zhuǎn)基因羊。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】細(xì)胞核和核糖體;Taq酶;BamHⅠ、HindⅡ;DNA連接酶;基因Leu;基因GFP;亮氨酸;不顯示;顯微注射;胚胎移植;內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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