回答與轉(zhuǎn)基因植物的培育和植物克隆有關(guān)的問題：
木瓜環(huán)斑病毒（PRV）是一種對木瓜危害極大的病毒，科學(xué)家通過基因工程技術(shù)將抗環(huán)斑病毒基因（PRSV）導(dǎo)入木瓜中表達(dá)出抗環(huán)斑病蛋白，從而獲得抗環(huán)斑病的木瓜。
（1）構(gòu)建重組DNA分子時，使用兩種限制性核酸內(nèi)切酶處理，優(yōu)點是可防止目的基因和切割后的載體DNA自身環(huán)化及反向拼接反向拼接。為使PRSV高效表達(dá)，需要對重組載體上目的基因相關(guān)的啟動部位（或啟動子）啟動部位（或啟動子）序列進(jìn)行修飾。
（2）獲取活性強(qiáng)的農(nóng)桿菌菌液，通過冰浴、離心、去上清液等相應(yīng)處理，加入適量預(yù)冷的含15%甘油的CaCl2CaCl2溶液，制成感受態(tài)農(nóng)桿菌細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后的農(nóng)桿菌要正常培養(yǎng)一段時間，才能置于含特定抗生素的培養(yǎng)基上篩選，正常培養(yǎng)一段時間的目的是讓農(nóng)桿菌恢復(fù)正常的生理狀態(tài)，表達(dá)抗生素抗性基因讓農(nóng)桿菌恢復(fù)正常的生理狀態(tài)，表達(dá)抗生素抗性基因。優(yōu)先選用木瓜受傷的受傷的（受傷的/完好的）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化，促使其不斷分裂形成愈傷組織。
（3）試管苗需鍛煉后才可移栽至大田，移栽時需先洗去沾在根上的瓊脂培養(yǎng)基沾在根上的瓊脂培養(yǎng)基以免栽后發(fā)霉。
（4）為了快速獲得穩(wěn)定遺傳的抗環(huán)斑病木瓜，可選擇花藥離體花藥離體培養(yǎng)獲得的細(xì)胞系作為受體細(xì)胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】反向拼接；啟動部位（或啟動子）；CaCl2；讓農(nóng)桿菌恢復(fù)正常的生理狀態(tài)，表達(dá)抗生素抗性基因；受傷的；沾在根上的瓊脂培養(yǎng)基；花藥離體
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：22引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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