菊花是重要的觀賞花卉,為增加菊花花色類型,某科研小組從植物A的基因文庫中選出花色基因C(圖1),并將其與質粒(圖2)重組,再借助農桿菌導入菊花中。圖3表示EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制酶的識別序列與切割位點。請分析并回答下列問題:
(1)利用PCR技術可擴增花色基因C,PCR技術擴增的原理是 DNA半保留復制DNA半保留復制。
(2)構建基因表達載體時,選用BamHⅠ和Sau3AⅠ分別處理基因C和質粒,理由是 BamHⅠ和Sau3AⅠ分別切割基因C兩端和質粒,產生相同黏性末端便于構建重組質粒BamHⅠ和Sau3AⅠ分別切割基因C兩端和質粒,產生相同黏性末端便于構建重組質粒;當基因C和質粒連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(3)從轉基因菊花中提取蛋白質,首先可用相應的抗體進行 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交,檢測花色基因C是否翻譯成相應蛋白等,其次,還需要進行 個體個體生物學水平的鑒定。
(4)經BamHⅠ處理后構建的重組質粒導入菊花細胞后,基因C不能表達,原因是質粒酶切部位的兩端無 啟動子和終止子啟動子和終止子,影響基因C轉錄。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】DNA半保留復制;BamHⅠ和Sau3AⅠ分別切割基因C兩端和質粒,產生相同黏性末端便于構建重組質粒;磷酸二酯鍵;抗原-抗體雜交;個體;啟動子和終止子
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:1難度:0.7
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