試卷征集
加入會員
操作視頻

蜂毒前溶血肽原是prepromelittin基因(以下簡稱PL基因)的表達(dá)產(chǎn)物,在蜜蜂體內(nèi)合成后首先加工成蜂毒溶血肽原(蜂毒肽前體蛋白),被進(jìn)一步水解形成分泌蛋白蜂毒肽。與蜂毒肽相比,蜂毒前溶血肽原具有較大的溶解度,且對細(xì)胞的破壞能力小,可利用基因工程方法合成蜂毒肽的前體產(chǎn)物。
(1)生產(chǎn)蜂毒肽常選用微生物做受體細(xì)胞,優(yōu)點(diǎn)是
微生物生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單,生產(chǎn)成本低,生長繁殖快、容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作
微生物生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單,生產(chǎn)成本低,生長繁殖快、容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作
(答出兩點(diǎn)即可);原核細(xì)胞
不能
不能
(填“能“或“不能“)將蜂毒溶血肽原加工成蜂毒肽,原因是
原核細(xì)胞無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,無法對表達(dá)出的蜂毒前溶血肽原進(jìn)行加工
原核細(xì)胞無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,無法對表達(dá)出的蜂毒前溶血肽原進(jìn)行加工
。
(2)為了解決(1)中的問題,對蜂毒前溶血肽原基因進(jìn)行改造(如圖1),以便后期用羥胺(一種能專一性裂解特定兩個氨基酸之間肽鍵的化合物)對生產(chǎn)出的蜂毒前溶血肽原進(jìn)行加工。根據(jù)圖1推測羥胺的識別位點(diǎn)是
Asn-Gly(NG丙氨酸-甘氨酸)
Asn-Gly(NG丙氨酸-甘氨酸)
。為實(shí)現(xiàn)最終生產(chǎn)有活性的蜂毒肽,與原DNA序列相比,改造后的序列末端還刪除了Gly的對應(yīng)編碼鏈序列,推測刪除的理由是
有活性的蜂毒肽末端沒有甘氨酸
有活性的蜂毒肽末端沒有甘氨酸
。改造后的DNA編碼區(qū)序列長度為
213
213
bp。
菁優(yōu)網(wǎng)
注:①陰影:蜂毒肽序列;方框:Asn-Gly位點(diǎn);
②圖1中所示的“原DNA序列”為蜂毒前溶血肽原的編碼區(qū)序列的編碼鏈;
③甲硫氨酸,縮寫為M,由起始密碼子AUG編碼;丙氨酸(Asn),縮寫為N;
④甘氨酸(Gly),縮寫為G,由密碼子GGU、GGC、GGA、GGG編碼。
⑤終止密碼子UAA、UGA和UAG
(3)根據(jù)改造后的基因序列,利用人工化學(xué)合成方法進(jìn)行全基因合成,設(shè)計并合成引物對合成基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,引物序列的長度越長、GC含量越高,PCR過程中退火溫度的設(shè)定值越
。將PCR產(chǎn)物和pGEX-4T-1載體利用酶
EcoRI、SalI和DNA連接酶(限制酶+DNA連接酶)
EcoRI、SalI和DNA連接酶(限制酶+DNA連接酶)
進(jìn)行基因表達(dá)載體的構(gòu)建,獲得蜂毒前溶血肽原與GST(一種標(biāo)簽蛋白)融合表達(dá)重組質(zhì)粒pGEX-4T-1/PPMe(見圖2)。擴(kuò)增PL基因時設(shè)計了引物對M1和M2,其中M1的部分序列是:5'-GAATTC-3'且EcoRⅠ的識別序列是GAATTC,請續(xù)寫出該引物的后8個堿基5'
ATGAAATT
ATGAAATT
3'。
(4)將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化至
不含有
不含有
(“含有“或“不含有”)pGEX-4T-1/PPMel的大腸桿菌的感受態(tài)細(xì)胞,借助PCR和電泳鑒定是否轉(zhuǎn)化成功:凝膠中DNA分子的遷移速率與
大小(長度),構(gòu)象(形狀),電荷,凝膠濃度,電壓
大?。ㄩL度),構(gòu)象(形狀),電荷,凝膠濃度,電壓
有關(guān)(答2點(diǎn))。
(5)若培育相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因植物;常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,需將目的基因插入質(zhì)粒的
T-DNA
T-DNA
中,最后通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植株。

【答案】微生物生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單,生產(chǎn)成本低,生長繁殖快、容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作;不能;原核細(xì)胞無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,無法對表達(dá)出的蜂毒前溶血肽原進(jìn)行加工;Asn-Gly(NG丙氨酸-甘氨酸);有活性的蜂毒肽末端沒有甘氨酸;213;高;EcoRI、SalI和DNA連接酶(限制酶+DNA連接酶);ATGAAATT;不含有;大?。ㄩL度),構(gòu)象(形狀),電荷,凝膠濃度,電壓;T-DNA
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/23 12:26:7組卷:13引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者:深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司| 應(yīng)用名稱:菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本:5.0.7 |隱私協(xié)議|第三方SDK|用戶服務(wù)條款
本網(wǎng)部分資源來源于會員上傳,除本網(wǎng)組織的資源外,版權(quán)歸原作者所有,如有侵犯版權(quán),請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù),本網(wǎng)將在三個工作日內(nèi)改正