2.與棉花發(fā)育相關(guān)的GhMADS12基因能調(diào)節(jié)棉花根、莖、葉、花的發(fā)育和果實(shí)的成熟??茖W(xué)家將克隆得到的GhMADS12基因與運(yùn)載體結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)若用PCR技術(shù)擴(kuò)增GhMADS12基因,需要在PCR儀中加入
種引物,引物的作用是
。除了引物、DNA模板之外,PCR反應(yīng)體系中還需提供
。(至少答2條)
(2)GhMADS12 和pBI121質(zhì)粒T-DNA經(jīng)限制酶SmaⅠ和XbaⅠ切割斷開(kāi)的化學(xué)鍵是
。原核生物中的限制酶不切割自身DNA的原因是
。
(3)圖中的CaMV35S為啟動(dòng)子,GUS為標(biāo)記基因,NOS為終止子,據(jù)圖分析,目的基因GhMADS12插入的具體位點(diǎn)是
。
A.啟動(dòng)子的上游
B.啟動(dòng)子的下游,終止子的上游
C.終止子的下游
D.任意位點(diǎn)
(4)ChMADS12基因進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞并在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為
,該過(guò)程常用Ca
2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于能吸收周圍DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為
。