研究表明，ICF45蛋白在腫瘤的發(fā)生及細(xì)胞周期調(diào)控中具有重要的生物學(xué)功能，為了更有效地研究ICF45蛋白的功能，研究人員通過(guò)構(gòu)建ICF45基因表達(dá)載體等過(guò)程制備了ICF45單克隆抗體，以下為相關(guān)過(guò)程。回答下列問(wèn)題：
（1）目的基因的獲取、質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)：在已知ICF45全長(zhǎng)基因序列和該基因比較小的情況下，可通過(guò)

人工合成或化學(xué)

人工合成或化學(xué)

方法獲取目的基因；也可通過(guò)PCR擴(kuò)增，欲擴(kuò)增該基因片段，首先需要以ICF45全長(zhǎng)基因片段為模板設(shè)計(jì)

引物

引物

。若從宮頸癌細(xì)胞系（Hela）細(xì)胞中提取總RNA，利用

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

酶合成cDNA，將ICF45基因片段進(jìn)行擴(kuò)增。ICF45基因片段和質(zhì)粒連接后，將重組載體轉(zhuǎn)入

感受態(tài)

感受態(tài)

大腸桿菌，少量培養(yǎng)后經(jīng)處理最終得到ICF45胞外純化蛋白。
（2）動(dòng)物免疫與雜交瘤細(xì)胞株的建立：對(duì)健康的實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行腹腔內(nèi)免疫，一周后取出小鼠脾細(xì)胞并用PEG與骨髓瘤細(xì)胞融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。在該培養(yǎng)基上，

未融合的親本細(xì)胞和同種細(xì)胞的融合細(xì)胞

未融合的親本細(xì)胞和同種細(xì)胞的融合細(xì)胞

都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和

抗體檢測(cè)

抗體檢測(cè)

，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。
（3）單克隆抗體的制備：將雜交瘤細(xì)胞在

體外條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)

體外條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)

，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，最后獲得單克隆抗體。