厭氧微生物在自然界中分布廣泛，種類繁多，作用也日益引起重視。由于它們不能代謝氧來進(jìn)一步生長，且多數(shù)情況下氧氣分子的存在對其有害，所以在進(jìn)行分離、培養(yǎng)時必須處于去除氧的環(huán)境下。分離和培養(yǎng)厭氧菌的方法很多，堿性焦性沒食子酸法是操作比較簡單的方法之一。焦性沒食子酸與堿溶液NaOH作用后形成易被氧化的堿性沒食子鹽，它能通過氧化作用除掉密封容器中的氧氣。
菌種：巴氏芽孢梭菌（一種厭氧菌）、熒光假單胞菌。
培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、葡萄糖牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。
溶液或試劑：焦性沒食子酸、10%NaOH溶液，滅菌的石蠟凡士林等。
儀器或其他用具：滅菌脫脂棉、滅菌的培養(yǎng)皿和培養(yǎng)皿蓋等。
請完成下列實驗步驟及相關(guān)問題：
（1）用滅菌完成的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行 倒平板倒平板（填操作步驟），待培養(yǎng)基凝固稍干燥后，在平板上最好采用 平板劃線平板劃線法一半接種巴氏芽孢梭菌，另一半接種熒光假單胞菌，并在皿底用記號筆作好標(biāo)記。
（2）滴加10%NaOH溶液約2mL于焦性沒食子酸上，切勿使溶液溢出脫脂棉，立即將 已接種的平板已接種的平板覆蓋于培養(yǎng)皿蓋上，必須將脫脂棉全部罩住，目的是既可以使堿性沒食子鹽充分去除氧氣，又防止 培養(yǎng)皿和皿蓋出現(xiàn)較大縫隙導(dǎo)致氧氣和雜菌進(jìn)入培養(yǎng)皿和皿蓋出現(xiàn)較大縫隙導(dǎo)致氧氣和雜菌進(jìn)入，除此之外，焦性沒食子酸反應(yīng)物不能與培養(yǎng)基表面接觸。最后，以溶化的石蠟凡士林液密封培養(yǎng)皿與皿蓋的接觸處，置30℃培養(yǎng)，定期觀察平板上菌種的生長狀況并記錄。
（3）在進(jìn)行厭氧培養(yǎng)時，同時接種熒光假單胞菌，它是一種 好氧好氧菌，目的是監(jiān)測容器內(nèi)的氧氣環(huán)境。
（4）各種厭氧微生物對氧的耐受能力有所不同。以下是采用深層瓊脂法（培養(yǎng)基不同深度含氧量不同）探究某種厭氧菌的耐氧能力實驗：
用無菌生理鹽水，制成菌懸液。將裝有葡萄糖牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的試管置于100℃水浴中溶化并保溫5～10min。將試管取出后，室溫靜置冷卻至45～50℃時，無菌操作吸取0.1mL細(xì)菌懸液加入試管中，雙手快速搓動試管（如圖），目的是 使菌種均勻分布于培養(yǎng)基中使菌種均勻分布于培養(yǎng)基中，不采用震蕩是避免達(dá)到目的的同時有過多的空氣混入培養(yǎng)基。之后將試管置于冰浴中，使培養(yǎng)基迅速凝固。將上述試管置于28℃溫室中靜置保溫48h后開始連續(xù)進(jìn)行觀察，直至結(jié)果清晰為止，根據(jù) 細(xì)菌在試管中的生長部位細(xì)菌在試管中的生長部位來判斷細(xì)菌的耐氧能力大小。
【答案】倒平板；平板劃線；已接種的平板；培養(yǎng)皿和皿蓋出現(xiàn)較大縫隙導(dǎo)致氧氣和雜菌進(jìn)入；好氧；使菌種均勻分布于培養(yǎng)基中；細(xì)菌在試管中的生長部位
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：1難度：0.7
相似題
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1．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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