圖1為胰島素基因結(jié)構(gòu)與引物位置示意圖，圖2為pBR322質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中EcoR I、Sma I、BamH I和HindⅢ為限制酶，箭頭或線段所指位點(diǎn)為對(duì)應(yīng)酶切位點(diǎn)。研究人員欲用此質(zhì)粒構(gòu)建胰島素基因的表達(dá)載體，培養(yǎng)能產(chǎn)生人胰島素的大腸桿菌。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：
（1）若要進(jìn)行胰島素基因的擴(kuò)增常采用PCRPCR技術(shù)。已知DNA新鏈的合成方向是5′→3′，若利用圖2中質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)該選擇的引物為引物4、引物5引物4、引物5。
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，選擇BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ作為分別切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和運(yùn)載體的正確連接效率，其原因是這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接。
（3）成功構(gòu)建的基因表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是提供RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄提供RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，若利用酵母菌作受體細(xì)胞生產(chǎn)胰島素，與大腸桿菌相比，利用酵母菌生產(chǎn)胰島素的優(yōu)勢(shì)有酵母菌為真核細(xì)胞，含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對(duì)核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工酵母菌為真核細(xì)胞，含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對(duì)核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工。若要檢測(cè)導(dǎo)入酵母菌的胰島素基因是否成功轉(zhuǎn)錄，常用DNA-RNA分子雜交DNA-RNA分子雜交（填“DNA-DNA分子雜交”或“DNA-RNA分子雜交”）技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；引物4、引物5；BamHⅠ和HindⅢ；這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接；提供RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄；酵母菌為真核細(xì)胞，含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對(duì)核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工；DNA-RNA分子雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：20引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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