番茄作為一種常見的水果蔬菜，在日常生活中的需求量日益增大，但是在較低溫度下運輸或儲存的過程中容易出現(xiàn)凍傷的現(xiàn)象，從而影響番茄的口感和品質(zhì)?？茖W(xué)家利用基因工程技術(shù)培育出抗凍的轉(zhuǎn)基因番茄。如圖為外源DNA和質(zhì)粒上標(biāo)出的酶切位點及相關(guān)基因，其中AFPs基因為抗凍基因?；卮鹣铝袉栴}：

（1）AFPs基因的基本組成單位是

脫氧核糖核苷酸

脫氧核糖核苷酸

。構(gòu)建圖中重組的基因表達(dá)載體時主要利用的工具酶有

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。
（2）科學(xué)家應(yīng)用圖中

BamHⅠ和HindⅢ

BamHⅠ和HindⅢ

兩種酶切割目的基因和質(zhì)粒，這樣做可以避免

酶切后的目的基因和質(zhì)粒自連或反向連接

酶切后的目的基因和質(zhì)粒自連或反向連接

。
（3）科研人員將重組表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時，為提高導(dǎo)入成功率，常利用CaCl₂處理農(nóng)桿菌，其目的是

使細(xì)菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，便于重組的基因表達(dá)載體的導(dǎo)入

使細(xì)菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，便于重組的基因表達(dá)載體的導(dǎo)入

。目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞中并且成功表達(dá)的轉(zhuǎn)基因番茄一定能在含

四環(huán)素

四環(huán)素

（填抗生素）的培養(yǎng)基上生長。
（4）科研人員通過對轉(zhuǎn)基因抗凍番茄細(xì)胞中AFPs基因的測序中發(fā)現(xiàn)了一基因突變株，該突變株會降低轉(zhuǎn)基因抗凍番茄抗凍性，如圖表示轉(zhuǎn)基因抗凍番茄和該番茄突變株的相關(guān)測序結(jié)果：

該突變株發(fā)生的基因突變類型是

堿基對的缺失

堿基對的缺失

。若將一個抗凍基因?qū)敕训囊粭l染色體上獲得轉(zhuǎn)基因抗凍番茄，讓該抗凍番茄植株連續(xù)自交兩代，則F₂中抗凍番茄純合體所占比例為

3

8

3

8

。