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人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過(guò)程。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題:
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(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),可以用
胰蛋白酶(膠原蛋白酶)
胰蛋白酶(膠原蛋白酶)
酶處理動(dòng)物組織,得到分散的組織細(xì)胞,培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸、生長(zhǎng)因子等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外,往往還需加入一定量的
動(dòng)物血清
動(dòng)物血清
,以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是
維持培養(yǎng)液的pH
維持培養(yǎng)液的pH
。
(2)為了刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞,每隔2周用cTnI作為
抗原
抗原
注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是
聚乙二醇 (PEG)
聚乙二醇 (PEG)
。為了獲得雜交瘤細(xì)胞,應(yīng)將甲放在
(HAT)選擇性
(HAT)選擇性
培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行
抗體
抗體
檢測(cè),之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè),并多次重復(fù)上述操作,其目的是篩選獲得抗cTnI抗體產(chǎn)量大、純度高的雜交瘤細(xì)胞丙。通過(guò)該技術(shù)獲得的單抗特點(diǎn)是
特異性強(qiáng)、靈敏度高
特異性強(qiáng)、靈敏度高
。
(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如圖2示:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與同一抗原結(jié)合,這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是
與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化底物水解
與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化底物水解

【答案】胰蛋白酶(膠原蛋白酶);動(dòng)物血清;維持培養(yǎng)液的pH;抗原;聚乙二醇 (PEG);(HAT)選擇性;抗體;特異性強(qiáng)、靈敏度高;與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化底物水解
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/21 8:0:9組卷:9引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.動(dòng)物體細(xì)胞融合后染色體核型不穩(wěn)定,來(lái)自某一方的染色體往往隨機(jī)丟失一至多條,這種現(xiàn)象常應(yīng)用于基因的定位。在甲型流感單克隆抗體的制備過(guò)程中,雜交瘤細(xì)胞在克隆化培養(yǎng)過(guò)程中來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往出現(xiàn)隨機(jī)丟失現(xiàn)象。不考慮基因互作和其他變異,下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/28 14:0:1組卷:17引用:4難度:0.7
  • 2.閱讀下列資料,回答相關(guān)問(wèn)題:
    資料1:用小鼠制備的抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕試劑盒”,檢測(cè)早孕的準(zhǔn)確率在90%以上。
    資料2:葡萄糖異構(gòu)酶在工業(yè)上應(yīng)用廣泛,為提高其熱穩(wěn)定性,朱國(guó)萍等人在確定第138位甘氨酸為目標(biāo)氨基酸后,用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸,結(jié)果其最適反應(yīng)溫度提高了10-12℃,使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)更具剛性。
    資料3:目前科學(xué)家已在牛和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素等重要藥品,大致過(guò)程如圖所示:
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    資料4:十九大提出“既要金山銀山,又要綠水藍(lán)天”,要實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)不僅需要對(duì)破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行恢復(fù),還要考慮當(dāng)?shù)厝说慕?jīng)濟(jì)發(fā)展和生活需要。
    (1)資料1中,在該“單抗”的生產(chǎn)過(guò)程中,將
     
    作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行接種后,從脾臟中提取B淋巴細(xì)胞,并設(shè)法將其與鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,選出融合的雜種細(xì)胞,對(duì)該細(xì)胞還需進(jìn)行
     
    培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的雜交瘤細(xì)胞。單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是
     
    。
    (2)資料2中提到的生物技術(shù)屬于
     
    工程的范疇。在該實(shí)例中,直接需要操作的是
     
    (選填“肽鏈結(jié)構(gòu)”、“蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)”、“基因結(jié)構(gòu)”)。
    (4)資料3中哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括[a]
     
    、[b]
     
    和受精等幾個(gè)主要步驟。若要充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛能,可給供體注射
     
    ,使其排出更多的卵子。若要一次獲得多只完全相同的轉(zhuǎn)基因牛,應(yīng)采用胚胎分割技術(shù),通常選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的
     
    或桑葚胚。
    (5)資料4主要遵循了生態(tài)工程的
     
    原理。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:6引用:1難度:0.7
  • 3.在某靶向膜蛋白抗體藥物的研發(fā)過(guò)程中,利用脂質(zhì)體將含有膜蛋白胞外段基因的病毒質(zhì)粒導(dǎo)入到宿主動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行增殖,最終獲得膜蛋白胞外段,以此作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,進(jìn)而制備相應(yīng)的單克隆抗體。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/10/27 7:0:2組卷:31引用:4難度:0.7
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