為研究肝癌致病機(jī)理，科研工作者利用如圖所示的差異雜交法和基因工程獲取相關(guān)癌基因以作進(jìn)一步研究。請(qǐng)據(jù)圖回答問題：
（1）圖1中，D過程需要回收 未雜交未雜交（填“未雜交”或“雜交分子”）的含32P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成，獲得 雙鏈cDNA雙鏈cDNA并用其構(gòu)建基因文庫。
（2）從圖1構(gòu)建的基因文庫中獲取的目的基因，一般還需進(jìn)行人工改造后才能用于基因表達(dá)載體的構(gòu)建，改造內(nèi)容除了在基因兩端添加 限制酶限制酶的識(shí)別序列外，還需添加 啟動(dòng)子啟動(dòng)子和 終止子終止子，以便其隨載體導(dǎo)入到受體細(xì)胞后，能正常調(diào)控表達(dá)過程。
（3）圖2為改造后的目的基因。圖3為兩種質(zhì)粒，其中Ampr為氨芐青霉素抗性基因，Tetr為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍(lán)色顯色基因，其表達(dá)產(chǎn)物可使底物X-Gal呈藍(lán)色。EcoRⅠ（0.7Kb）NotⅠ（1.2Kb）等為限制酶及其切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)之間的距離（1kb=100個(gè)堿基對(duì)）。
①圖3中能作為載體的最理想的質(zhì)粒是 XX（填“X”或“Y”），理由是 質(zhì)粒X上既有抗生素抗性基因，也有l(wèi)acz藍(lán)色顯色基因，便于目的基因篩選質(zhì)粒X上既有抗生素抗性基因，也有l(wèi)acz藍(lán)色顯色基因，便于目的基因篩選。用選定的質(zhì)粒與圖2的目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是 NotINotI。為篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞，培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加 四環(huán)素和X-Gal四環(huán)素和X-Gal。
②若用EcoRⅠ完全切上述①中獲得的重組質(zhì)粒，并進(jìn)行電泳觀察，可出現(xiàn)四種長度不同的片段，其長度分別為1.7kb、5.3kb、3.1kb3.9kb3.1kb3.9kb。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】未雜交；雙鏈cDNA；限制酶；啟動(dòng)子；終止子；X；質(zhì)粒X上既有抗生素抗性基因，也有l(wèi)acz藍(lán)色顯色基因，便于目的基因篩選；NotI；四環(huán)素和X-Gal；3.1kb3.9kb
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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