四尾柵藻具有環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)和生長速度快等優(yōu)點,如果能將其進(jìn)行品種改良,提高含油量,有望解決微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術(shù)將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁澹@得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。操作過程如圖,請回答下列問題:
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注:LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解白色物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無該基因或該基因被破壞,則菌落呈白色
(1)將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導(dǎo)入大腸桿菌前,通常先用 CaCl2CaCl2處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
(2)圖中接種大腸桿菌的培養(yǎng)基pH 一般為 中性或弱堿性(中性偏堿)中性或弱堿性(中性偏堿)。為了便于重組質(zhì)粒的篩選,該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。 白色白色(填“白色”或“藍(lán)色”)菌落的大腸桿菌中導(dǎo)入了目的基因。
(3)將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導(dǎo)入大腸桿菌的目的是 擴(kuò)增目的基因(DGAT1基因)擴(kuò)增目的基因(DGAT1基因)。
(4)由上圖推測,用 BamHIBamHI和 XbaIXbaI酶切割pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接再次構(gòu)建基因表達(dá)載體,用這兩種酶切割是為了有效避免 反向連接和自身環(huán)化反向連接和自身環(huán)化。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】CaCl2;中性或弱堿性(中性偏堿);氨芐青霉素和X-gal;白色;擴(kuò)增目的基因(DGAT1基因);BamHI;XbaI;反向連接和自身環(huán)化
【解答】
【點評】
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