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如圖1是限制酶BamHⅠ與BglⅡ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)示意圖,圖2表示質(zhì)粒pZHZ11(總長(zhǎng)為3.8kb,1kb=1000對(duì)堿基)的結(jié)構(gòu),其中,Ap′為鏈霉素抗性基因,lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶,該酶催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍(lán)色。請(qǐng)分析回答問(wèn)題:

(1)圖1表明,酶的作用具有
專(zhuān)一
專(zhuān)一
性,利用圖2構(gòu)建成基因表達(dá)載體,還必須加入的組成元件是
目的基因
目的基因

(2)若先用限制酶BamHⅠ切開(kāi)pZHZ11,然后滅活BamHⅠ酶,再加
DNA連接
DNA連接
酶進(jìn)行連接,最后將連接物導(dǎo)入足夠數(shù)量的大腸桿菌細(xì)胞中,則可使細(xì)胞呈藍(lán)色的質(zhì)粒的最短長(zhǎng)度是
3.8kb
3.8kb
。
(3)若將兩端分別用限制酶BamHⅠ和BglⅡ切開(kāi)的單個(gè)目的基因片段置換pZHZ11中0.5kb的BamHⅠ酶切片段,形成4.9kb的重組質(zhì)粒,則目的基因長(zhǎng)度為
1.6
1.6
kb。
(4)上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式,若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯(lián)合酶切其中一種,只能獲得1.6kb和3.3kb兩種DNA片段;那么聯(lián)合酶切同等長(zhǎng)度的另一種重組質(zhì)粒,則可獲得
1.7
1.7
kb和
3.2
3.2
kb兩種DNA片段。
(5)若pZHZ11上基因表達(dá)時(shí)的堿基序列方向是逆時(shí)針的,為使目的基因定向插入,并獲得在含鏈霉素的培養(yǎng)基上存活且顯白色的大腸桿菌,則切割目的基因編碼區(qū)下游的限制酶應(yīng)為
BamHI或BglⅡ
BamHI或BglⅡ
(從題圖涉及的限制酶中選擇)。

【答案】專(zhuān)一;目的基因;DNA連接;3.8kb;1.6;1.7;3.2;BamHI或BglⅡ
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:27引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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