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人類胰島素基因位于第11號染色體上,長度為8416bp,人類胰島素的氨基酸序列已知?;卮鹣铝邢嚓P問題。
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(1)如圖是利用PCR技術獲取人胰島素基因的方法,除了此方法外,還可以利用的方法是
從基因文庫獲取或人工合成
從基因文庫獲取或人工合成
。
(2)利用PCR技術獲取人胰島素基因,在緩沖液中除了要添加模板和引物外,還需要添加的物質有
四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
。
(3)至少經過
3
3
輪循環(huán)可以得到所需的目的基因,一個DNA分子經過5輪循環(huán),需要引物A
31
31
個,從PCR的過程和DNA分子的特點,試著寫出設計引物需要注意的問題:
引物自身不能有互補序列 引物之間不能有互補序列
引物自身不能有互補序列 引物之間不能有互補序列
引物長度適當、引物能與目的基因兩側特異性結合、避免與擴增DNA內有過多互補的序列
引物長度適當、引物能與目的基因兩側特異性結合、避免與擴增DNA內有過多互補的序列
(答出2點即可)。
(4)利用瓊脂糖凝膠電泳分離不同DNA分子,遷移速率與
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象
,(寫出3點)等有關。
(5)利用圖示方法獲取的目的基因,直接構建基因表達載體后導入大腸桿菌,
不能
不能
(填“能”或“不能”)表達出人胰島素,理由是
因為此方法獲得的目的基因中含有內含子,大腸桿菌無法正常識別內含子而對內含子部分轉錄的mRNA進行翻譯,導致合成的蛋白質出現(xiàn)錯誤
因為此方法獲得的目的基因中含有內含子,大腸桿菌無法正常識別內含子而對內含子部分轉錄的mRNA進行翻譯,導致合成的蛋白質出現(xiàn)錯誤
。

【答案】從基因文庫獲取或人工合成;四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);3;31;引物自身不能有互補序列 引物之間不能有互補序列;引物長度適當、引物能與目的基因兩側特異性結合、避免與擴增DNA內有過多互補的序列;凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象;不能;因為此方法獲得的目的基因中含有內含子,大腸桿菌無法正常識別內含子而對內含子部分轉錄的mRNA進行翻譯,導致合成的蛋白質出現(xiàn)錯誤
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/22 8:0:10組卷:5引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.科研人員克隆了豬白細胞抗原基因(SLA-2基因),構建了該基因的真核表達載體,進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1,SLA-2基因長度為1100bp,質粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復制原點的距離。請回答:
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    限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ
    識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
    (1)過程①中,PCR擴增SLA-2的原理是
     
    ,下列4種引物中應選擇的是
     
    。
    a  5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
    b  5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
    c  5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
    d  5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
    (2)過程②將重組質粒導入大腸桿菌的目的是
     
    ,該過程需要用
     
    處理大腸桿菌,使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有
     
    (抗生素)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
    (3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質粒C后電泳,請在答題紙相應位置畫出可能得到的電泳條帶。
    (4)科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選,一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是:既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓
     
    。實驗結果如圖2,根據(jù)實驗結果最佳的嘌霉素篩選濃度為
     

    (5)過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產的抗原肽,其原理是
     
    ,單克隆抗體能檢測其是否具有正確的
     
    ,從而是否具有生物活性。
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    發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:41引用:3難度:0.6
  • 2.以下是有關分離與鑒別DNA的技術,其中說法正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/15 16:30:6組卷:5引用:1難度:0.5
  • 3.下列關于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗,說法錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:3引用:1難度:0.6
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