科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過(guò)程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)過(guò)程①所需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶。-般采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列,原因是根據(jù)這一序列合成引物根據(jù)這一序列合成引物。
(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中,用限制酶Ⅰ限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒,獲取目的基因時(shí)只年用一種限制酶,應(yīng)用限制酶Ⅱ限制酶Ⅱ切割目的基因所在的外源DNA.用限制酶切割目的基由和載體后形成的黏性末端在DNA連接酶的催化作用中通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,原因是人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同。
(3)在過(guò)程③中一般將受體大腸桿菌用CaCl2溶液(Ca2+)進(jìn)行處理,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶;根據(jù)這一序列合成引物;限制酶Ⅰ;限制酶Ⅱ;堿基互補(bǔ)配對(duì);人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同;感受態(tài)細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:14引用:2難度:0.6
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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