當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年江蘇省南京市江寧區(qū)高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

干燥綜合征（SS）是一種自身免疫病，患者血清中存在多種抗體，其中SSB抗體特異性最強(qiáng)。科研人員為生產(chǎn)SSB抗體的檢測(cè)試劑，利用基因工程獲得重組SSB蛋白，流程如下，請(qǐng)回答：

（1）利用RNA通過①過程獲得cDNA需要
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶，從而獲得SSB基因，SSB基因通過PCR擴(kuò)增，其延伸階段需要
耐高溫的DNA聚合
耐高溫的DNA聚合
酶的參與，而且在緩沖液中添加
Mg²⁺
Mg²⁺
以便激活該酶的活性。目的基因片段擴(kuò)增n代，共需要
2ⁿ⁺¹-2
2ⁿ⁺¹-2
個(gè)引物。
（2）PCR循環(huán)之前，常要進(jìn)行一次預(yù)變性，預(yù)變性的目的是增加
模板DNA徹底變性
模板DNA徹底變性
的概率，用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)
不必
不必
（填“必須”或“不必”）知道基因的全部序列。
（3）為與PET41a質(zhì)粒連接，獲得的目的基因A兩端要含有
BamHI和XhoI
BamHI和XhoI
（寫出限制酶名稱）酶切位點(diǎn)。DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
。
（4）獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒，獲得片段大小見表格（1kb=1000堿基對(duì)），分析數(shù)據(jù)，計(jì)算可得SSB基因的長(zhǎng)度為
3Kb
3Kb
。與人基因組文庫(kù)中的SSB基因相比，通過①過程獲得的SSB基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
無(wú)
無(wú)
（填“有”或“無(wú)”）啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子等非編碼序列。

限制酶 EcoRI BanHI和XhoI

原質(zhì)粒 8.1kb 2.7kb、5.4kb

重組質(zhì)粒 3.4kb、5.0kb 未做該處理

（5）②過程目的是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入到用
Ca²⁺
Ca²⁺
處理過的大腸桿菌內(nèi)，并接種于添加
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上，收集菌落進(jìn)行鑒定，將陽(yáng)性菌落進(jìn)一步純化后再將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．

【答案】逆轉(zhuǎn)錄；耐高溫的DNA聚合；Mg²⁺；2ⁿ⁺¹-2；模板DNA徹底變性；不必；BamHI和XhoI；磷酸二酯鍵；3Kb；無(wú)；Ca²⁺；卡那霉素

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。

當(dāng)前模式為游客模式，立即登錄查看試卷全部?jī)?nèi)容及下載

發(fā)布：2024/5/22 8:0:8組卷：6引用：1難度：0.6

相似題

1．某種結(jié)腸癌細(xì)胞存在抑癌基因A的突變，研究人員準(zhǔn)備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上，用于后續(xù)癌癥發(fā)生機(jī)制和癌癥治療的研究。下列說法正確的是（　?。?/h2>

A．為保證抑癌基因A正確連入，質(zhì)粒載體上最少需要1個(gè)限制酶切割位點(diǎn)

B．只要抑癌基因A正確連入質(zhì)粒載體，就可以在大腸桿菌中成功表達(dá)

C．可利用Ca²⁺轉(zhuǎn)化法將該質(zhì)粒載體導(dǎo)入大腸桿菌或癌細(xì)胞內(nèi)

D．可利用洋蔥DNA粗提取實(shí)驗(yàn)的部分步驟提取導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)的質(zhì)粒載體

發(fā)布：2024/10/28 10:30:1組卷：5引用：2難度：0.7

解析

2．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并將其分泌到尿液中．這是繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展．
（1）將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用的方法是

．所使用到儀器是

．
（2）在基因工程中，將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)，必須用

酶和

酶．常用的運(yùn)載體有

、

、

等，而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件，例如應(yīng)具有

以便進(jìn)行篩選．進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的

中，原因是

．
（3）通常采用

技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中．
（4）在研究膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的

細(xì)胞中特異性表達(dá)．
（5）如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于

．
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：1難度：0.3
解析
3．抗凝血酶是一種天然抗凝血?jiǎng)?，在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：

（1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因，應(yīng)選用引物

（填引物名稱），擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶

切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
（2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動(dòng)子，其作用是

，將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長(zhǎng)出了多個(gè)大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是

。
（3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過

方法導(dǎo)入到豬或羊的

細(xì)胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
解析

把好題分享給你的好友吧~~

限制酶	EcoRI	BanHI和XhoI
原質(zhì)粒	8.1kb	2.7kb、5.4kb
重組質(zhì)粒	3.4kb、5.0kb	未做該處理

1．某種結(jié)腸癌細(xì)胞存在抑癌基因A的突變，研究人員準(zhǔn)備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上，用于后續(xù)癌癥發(fā)生機(jī)制和癌癥治療的研究。下列說法正確的是（ ?。?/h2>

1．某種結(jié)腸癌細(xì)胞存在抑癌基因A的突變，研究人員準(zhǔn)備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上，用于后續(xù)癌癥發(fā)生機(jī)制和癌癥治療的研究。下列說法正確的是（　?。?/h2>