切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切核酸酶（簡(jiǎn)稱限制酶），它們能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	Sau3AⅠ	HindⅢ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC CCTAG↑G	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	A↓AGCTT TTCGA↑A

（1）在基因工程的基本操作程序中，核心步驟是

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

，其作用是

讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

。
（2）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用表中

BclⅠ和HindⅢ

BclⅠ和HindⅢ

兩種限制酶切割，不選用另外兩種酶的理由是

若選用BamHⅠ或Sau3AⅠ酶會(huì)使質(zhì)粒中的兩個(gè)標(biāo)記基因損壞，不利于后續(xù)重組質(zhì)粒的篩選

若選用BamHⅠ或Sau3AⅠ酶會(huì)使質(zhì)粒中的兩個(gè)標(biāo)記基因損壞，不利于后續(xù)重組質(zhì)粒的篩選

。
（3）不同的限制酶切割可能產(chǎn)生相同的黏性末端，從而可以使不同的限制酶切割的末端能夠配對(duì)連接，這在基因工程操作中有什么積極意義？

使切割位點(diǎn)的選擇范圍擴(kuò)大

使切割位點(diǎn)的選擇范圍擴(kuò)大

。若BamHⅠ酶切的DNA黏性末端與BclⅠ酶切的DNA黏性末端通過(guò)DNA連接酶相連接，連接后的DNA序列，這兩種酶

都不能

都不能

（填“都能”“都不能”或“只有一種能”）切開(kāi)。