基因工程的興起給基因治療帶來了曙光。1990年9月,美國對一名患有嚴(yán)重復(fù)合型免疫缺陷綜合征的4歲女童,實施了基因治療?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因治療是把 正常基因正?;?/div>導(dǎo)入病人體內(nèi),使其表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療疾病的目的。上述女童的臨床試驗,先從病人體內(nèi)獲得淋巴細(xì)胞,進行培養(yǎng),然后在體外完成基因轉(zhuǎn)移,再將轉(zhuǎn)移成功的細(xì)胞重新輸入患者體內(nèi),這種方法稱為 體外體外基因治療。
(2)淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境。保證培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌、無毒環(huán)境的具體措施有 對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理;在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理;在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液(至少寫出兩點)。目前使用的淋巴細(xì)胞通常為10代以內(nèi),原因是 能保持細(xì)胞正常的二倍體核型能保持細(xì)胞正常的二倍體核型。當(dāng)貼壁的淋巴細(xì)胞生長到表面相互接觸時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 接觸抑制接觸抑制。
(3)體外進行基因轉(zhuǎn)移的過程通常使用 花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和感受態(tài)細(xì)胞花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和感受態(tài)細(xì)胞法。若受體細(xì)胞中未檢測出轉(zhuǎn)入了的目的基因的表達(dá)產(chǎn)物,可能的原因是 目的基因沒有轉(zhuǎn)錄或者是目的基因轉(zhuǎn)錄完成卻不能正常翻譯目的基因沒有轉(zhuǎn)錄或者是目的基因轉(zhuǎn)錄完成卻不能正常翻譯。【答案】正?;?;體外;對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理;在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液;能保持細(xì)胞正常的二倍體核型;接觸抑制;花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和感受態(tài)細(xì)胞;目的基因沒有轉(zhuǎn)錄或者是目的基因轉(zhuǎn)錄完成卻不能正常翻譯【解答】【點評】聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:1難度:0.6
體外
體外
基因治療。(2)淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境。保證培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌、無毒環(huán)境的具體措施有
對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理;在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液
對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理;在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液
(至少寫出兩點)。目前使用的淋巴細(xì)胞通常為10代以內(nèi),原因是 能保持細(xì)胞正常的二倍體核型
能保持細(xì)胞正常的二倍體核型
。當(dāng)貼壁的淋巴細(xì)胞生長到表面相互接觸時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 接觸抑制
接觸抑制
。(3)體外進行基因轉(zhuǎn)移的過程通常使用
花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和感受態(tài)細(xì)胞
花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和感受態(tài)細(xì)胞
法。若受體細(xì)胞中未檢測出轉(zhuǎn)入了的目的基因的表達(dá)產(chǎn)物,可能的原因是 目的基因沒有轉(zhuǎn)錄或者是目的基因轉(zhuǎn)錄完成卻不能正常翻譯
目的基因沒有轉(zhuǎn)錄或者是目的基因轉(zhuǎn)錄完成卻不能正常翻譯
。發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:1難度:0.6
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1.人類基因組計劃測定了人體的24條染色體,這24條染色體是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/31 0:30:1組卷:112引用:7難度:0.7 -
2.學(xué)習(xí)以下材料,回答(1)~(4)題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子(UAA、UAG或UGA),從而使肽鏈合成提前終止,造成蛋白質(zhì)的功能改變,引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%~15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?;虻腸DNA序列或是有治療價值的基因(如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具)通過一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi),達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過高或過低表達(dá),都可能會導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達(dá),但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA(sup-tRNA)由天然tRNA改造而來,它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子,使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯,獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因,是相關(guān)基因發(fā)生無義突變,產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體(圖1),以及針對該無義突變設(shè)計的sup-tRNA表達(dá)載體(產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr),將其導(dǎo)入細(xì)胞進行研究,發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較,sup--tRNA的作用更加顯著(圖2);進一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中,實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存,實現(xiàn)對該病癥的有效治療,其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看,G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機,而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一,且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài),所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性,因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
(1)侵染時,作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的
(2)除了引入的氨基酸較為單一,不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài),我們還可推斷,用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處
(3)研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體,目的是通過檢測
(4)有文獻(xiàn)報道,已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計獨特的治療策略,這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應(yīng)用價值。發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:26引用:1難度:0.6 -
3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi),可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
(1)圖示以mRNA為材料通過
(2)與選用老葉相比,選用嫩葉更容易提取到mRNA,原因是
(3)將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:5引用:1難度:0.7
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